产品名称：分散酶Dispase II
货号：LZ-PYJ4995
规格 100 mg / 1 g
比活性（Specific Activity） ≥0.8 U/mg (+37℃, casein as substrate, pH 7.5)
单位定义（Unit Definition） 在温度37℃、pH值为7.5的条件下，每分钟水解酪蛋白释放出相当于1 μM(181 μg)酪氨酸的福林阳性氨基酸和肽所需要的酶量，即为一个蛋白酶活性单位，以U表示。
pH（pH Optimum） 6.0-8.5
抑制剂（Inhibitors） EDTA, EGTA, Hg2+, 其他金属离子。血清不会抑制dispase活性。
激活剂（Activator） Ca2+，Mg2+，Mn2+，Fe2+，Fe3+，Al3+。的Ca2+浓度为2 mM。本酶制品已含足量的Ca2+使其处于活性。
产品特性
1）  EC NO：3.4.24.4
2）  同义名：Neutral protease中性蛋白mei
3）  比活力：≥0.8 U/mg protein (37℃, casein as substrate, pH 7.5)
4）  酶活力单位定义：在37℃，pH 7.5的反应条件下，1min内释放福林酚阳性反应氨基酸和多肽量相当于1 μmol (181 μg)酪氨suan所需的酶量即为一个活力单位。
5）  pH：6.0 - 8.5
6）  激活剂：Ca2+为2mM，该酶已含足量Ca2+确保酶活力。
7）  抑制剂： EDTA, EGTA, Hg2+,以及其他重金属。该酶活性不受血清干扰
使用方法
一、储存液和工作液制备
1）储存液制备：用Hepe缓冲盐溶液（50 mM Hepes/KOH pH7.4, 150 mM NaCl）溶解Dispase II冻干粉，配制成10mg/ml的储存液，用0.22μM滤膜过滤除菌。本储存液置于2-8℃，2周稳定；根据单次用量分装冻存，高达2个月稳定，避免反复冻融。
2）工作液制备：使用时用合适的细胞培养液将储存液稀释到工作液浓度即可，常用工作浓度为0.6-2.4 U/ml。不推荐使用>2.4 U/ml的工作浓度。具体使用浓度请根据自身实验体系或参考文献来调整。
组织分离
1）用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4mm小片，之后用无菌PBS缓冲液清洗组织片几次；
2）用Dispase II工作液（0.6-2.4 U/ml）浸没并37℃孵育进行组织解离；
3）置于水平摇床上，低速转动，37℃孵育直至组织完quan解离；【注意】：次使用Dispase II，通过细胞计数来确定总反应时间。对于坚硬致密组织需要1h的孵育时间，不过孵育时间几小时也不会有副作用。
4）若有需要，将消化产物用无菌不锈钢网过筛，从而分离解散细胞和残留组织，或当更大片段组织静置到管底，轻轻倒出上层细胞。若需要进一步解离，则加入新鲜的Dispase II工作液到残留组织。
5）低速离心收集细胞，吸掉酶工作液；
6）用适当的细胞培养液重悬细胞，置于正常预优化条件下培养。
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