- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZX9318
- 发布日期: 2020-12-17
- 更新日期: 2024-12-11
产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZX9318 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 详见说明书 |
细胞形态 | 上皮样 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | A型 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长 |
物种来源 | 详见说明书 |
包装规格 | 株 |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
细胞名称 Cas9稳定表达的人细胞;PC-3-Cas9-578
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长
特征特性: 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单,经WesternBlotting验证该可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件: F12K10%FBS;400ug/mlG418
传代方法: 1:3~1:6传代;每周2~3次换液。
传代情况: C3
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
产品名称 | Cas9稳定表达的人细胞;PC-3-Cas9-578规格 |
生长特性 | 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长 |
货号 | LZX9318 |
传代方法:
产品仅用于科研收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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兔正常气管上皮细胞;RNTEC/HL-035RabbitNormalTrachealEpithelialCellsRNTEC/HL-035Anti-RAD17 Polyclonal Antibody 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
细胞;HLCC/HL-023HumanLungCancerCellsHLCC/HL-023Anti-RBP4 Polyclonal Antibody 上皮样生长特性: 贴壁生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次