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Cas9稳定表达的人细胞;PC-3-Cas9-578规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZX9318
  • 价格: ¥电询
  • 发布日期: 2020-12-17
  • 更新日期: 2024-02-21
产品详请
产地 进口、国产
保存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
品牌 联祖
货号 LZX9318
组织来源 详见说明书
细胞形态 上皮样
是否是肿瘤细胞
规格
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 A型
品系 详见说明书
用途范围 公司产品仅用于科研
生长状态 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长
物种来源 详见说明书
纯度 %
是否进口

细胞名称 Cas9稳定表达的人细胞;PC-3-Cas9-578

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长

特征特性: 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单,经WesternBlotting验证该可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件: F12K10%FBS;400ug/mlG418

传代方法: 1:3~1:6传代;每周2~3次换液。

传代情况: C3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

 


特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

产品名称

Cas9稳定表达的人细胞;PC-3-Cas9-578规格

生长特性

贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长

货号

LZX9318

传代方法:

产品仅用于科研收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。

注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
注意事项:

1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。

6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。

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兔正常气管上皮细胞;RNTEC/HL-035RabbitNormalTrachealEpithelialCellsRNTEC/HL-035Anti-RAD17 Polyclonal Antibody 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次

细胞;HLCC/HL-023HumanLungCancerCellsHLCC/HL-023Anti-RBP4 Polyclonal Antibody 上皮样生长特性: 贴壁生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次