传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 杂交瘤细胞株；P24-5C2

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

鸡腿蘑（毛头鬼伞）Bisdemethoxycucurmin分子式：C19H16O4

金针菇Bis(phenylacetyl) disulfide分子式：C16H14O2S2

珊瑚色诺卡氏菌2,5-Bis(5-tert-butyl-2-benzoxazolyl)thiophene分子式：C26H26N2O2S

蛎灰链霉菌N,N'-Bis(salicylidene)-1,3-propanediamine分子式：C17H18N2O2

淡天蓝色链霉菌N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide分子式：C6H12N2O4

抗生链霉菌9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene分子式：C29H26O4

大丽花轮枝孢1,2-Bis(phenylthio)ethane分子式：C14H14S2

出芽短梗霉N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine分子式：C14H22N4O4

黄曲霉2,2-Bis(4-chlorophenyl)-1,1-dichloroethane分子式：C14H10Cl4

土曲霉2,2-Bis(4-chlorophenyl)-1,1-dichloroethylene分子式：C14H8Cl4

桔青霉4,7-Bis(5-bromo-2-thienyl)-2,1,3-benzothiadiazole分子式：C14H6Br2N2S3

大毛霉Benzimidazole分子式：C7H6N2

五通桥毛霉Benzoin oxime分子式：C14H13NO2

亮白曲霉1-Benzhydrylpiperazine分子式：C17H20N2

康宁木霉Benzopinacol分子式：C26H22O2

中华根霉5-Benzimidazolecarboxylic acid分子式：C8H6N2O2

紫红曲霉Benzoin isopropyl ether分子式：C17H18O2

红曲霉m-Anisic acid分子式：C8H8O3

烟曲霉2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate分子式：C12H14N2S3

臭曲霉p-Anisoin分子式：C16H16O4
杂交瘤细胞株；P24-5C2说明书[Met5,Arg6,Phe7] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe

[Met5,Arg6,Phe7] Enkephalin, amideTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe-NH2

[Met5,Arg6] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg

[Met5,Arg6] Enkephalin-ArgTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Arg

[Nle10]-Neurokinin A (4-10)Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2

[Nle11] Substance PArg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Nle-NH2

[Nle13, Glu14] Motilin, human, porcinePhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Nle-Glu-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

[Nle13]-MotillinPhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Nle-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

[Nle21,Tyr32] Corticotropin Releasing Factor, ovineSer-Gln-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Nle-Thr-Lys-Ala-Asp-Gln-Leu-Ala-Gln-Gln-Ala-Tyr-Ser-Asn-Arg-Lys-Leu-Leu-Asp-Ile-Ala- NH2

[Nle253]-HSV-1 UL 26 Open Reading Frame (238-257)Gly-Ile-Ala-Gly-His-Thr-Tyr-Leu-Gln-Ala-Ser-Glu-Lys-Phe-Lys-Nle-Trp-Gly-Ala-Glu

[Nle27]-GRF (1-29) amide (human)Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg- NH2