传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 SV40T转化人脐内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: PUMC-HUVEC-T1形态呈现为典型的鹅卵石样排列，已证明在体外可传至40代。PUMC-HUVEC-T1内皮标记vWF、CD31、CD34均阳性，可结合凝集素，电镜下可见紧密连接和W-P小体，Matrigle上可形成管型。不同代数的HUVEC-T1细胞核型正常稳定（P12、P13、P19、P38），裸鼠体内接种不成瘤（P9和P33）。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS40μU/L胰岛素+40U/ml肝素+1%NEAA

传代方法: 1:3～1:4传代，一周1～2次

传代情况: P12

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

多巴胺D3受体检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%Dopamine D3 receptor

戊糖苷素检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%pentosidine

盐酸二甲双胍检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%Metformin Hydrochloride

Ras 蛋白检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清，10%Ras protein

干扰素诱导蛋白1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%interferon-inducible protein 1

载脂蛋白B48检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)优质胎牛血清，10%apoprotein B48

巨噬细胞炎性蛋白检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清，15%；10ug/ml胰岛素和10ug/ml谷胱甘肽Macrophage Inflammatory Protein

Ⅰ型胶原α1检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%Collagen TypeⅠα1

Ⅰ型胶原α2检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清，10%Collagen TypeⅠα2

Gremlin-1蛋白检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清，10%Gremlin-1

P-CREB检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%P-CREB

UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A3检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%UDP-glucumno-syltransferase 1 Family polypeptide A3

UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A4检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清，10%；10ug/ml胰岛素和16ug/ml谷胱甘肽UDP-glucumno-syltransferase 1 Family polypeptide A4

NAD合成酶检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)优质胎牛血清，10%NADSYN

黄嘌呤脱氢酶;氧化酶检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%xanthine dehydrogenase;oxidase

尿酸氧化酶检测试剂盒生长特性: 贴壁生长培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%Uricase

T淋巴细胞亚群CD4+检测试剂盒生长特性: 悬浮生长培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%CD4+
SV40T转化人脐内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1价格秦皮甲素531-75-9英文名：Esculin  

英文别名：6,7-Dihydroxycoumarin;6-glucoside hydrat  

CAS登录号：531-75-9

分子式：C15H16O9?xH2O

分子量：340.28

分子结构：

外观：白色针状结晶

规格：20mg/支

纯度：≥ 98%

用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源：七叶树科植物欧洲七叶树Aesculushippo

贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年