传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 蚊子幼虫体细胞；AedesalbopictuscloneC6/36

形态特性:

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 蚊子幼虫体细胞；贴壁生长

培养条件:

传代方法:

传代情况:

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..细胞名称: 人急性T淋巴细胞细胞；JurkatE6-1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Corynebacterium pseudodiphtheriticum Lehman ..细胞名称: 人乳腺导管癌细胞；MDA-MB-435 L15:LeibovitzMedium10%FBS

Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula细胞名称: 人细胞；MDA-MB-436 L15:LeibovitzMedium10%FBS；10mcg/mlinsulin,16mcg/mlglutathione

Nectria candicans (Plowright) Samuels细胞名称: 人肺鳞癌细胞；NCI-H1703 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

dried细胞名称: 人大细胞细胞；NCI-H460 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..细胞名称: 人肺鳞癌细胞；NCI-H2170 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Trichomitus sp.细胞名称: 人大细胞细胞；NCI-H661 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Ochroconis gallopavum (Cooke) de Hoog, anam ..细胞名称: 人小细胞细胞；NCI-H69 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Simian virus 40, Simian virus 40细胞名称: 人浆细胞细胞；NCI-H929 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；0.05mM2-巯基乙醇

Bacillus pumilus Meyer and Gottheil细胞名称: 人结直肠腺癌细胞；NCI-H716 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..细胞名称: 人卵巢上皮细胞癌细胞；OV-1063 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Mus musculus, mouse Target Gene: RIKEN cDNA ..细胞名称: 人卵巢腺癌细胞；OVCAR-3 RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

Candida takata Lee细胞名称: 人非小细胞细胞；NCI-H524 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..细胞名称: 人胚肾细胞；293FT DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；0.1mMMEMNon-Essential+AminoAcids(NEAA)+2mML-glutamine+1%Pen-Strep(optional)+500?g/mlGeneticin

Homo sapiens, human细胞名称: 小鼠细胞；B16-F1 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Sporidiobolus salmonicolor Fell et Tallman细胞名称: 人胸腺激酶缺陷型细胞；143TK- MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS
蚊子幼虫体细胞；AedesalbopictuscloneC6/36规格髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒PF3ELISAKit产品规格:48T/96T。

1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA试剂盒PF3ELISAKit产品规格:48T/96T。

可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒PF3ELISAKit产品规格:48T/96T。

骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒PF3ELISAKit产品规格:48T/96T。

降钙素(CT)ELISA试剂盒PF-4ELISAKit产品规格:48T/96T。

骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒PF-4ELISAKit产品规格:48T/96T。

全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒PF-4ELISAKit产品规格:48T/96T。

骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒PF-4ELISAKit产品规格:48T/96T。