传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 人原位胰腺腺癌细胞；BxPC-3

形态特性: 上皮样，多角形

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞不表达囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)；CFTR阳性的细胞株是Capan-1。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:3~1:6传代；每周2~3次换液。

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

人胚肾293转染细胞；HEK293-RANK&NF-κB-RE-luc形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长PE标记的兔抗小鼠k链

小鼠杂交瘤细胞株；4C11形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE标记的羊抗小鼠IgG

人；LCAd-001形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长PE-Cy3标记的兔抗生物素抗体IgG

小鼠杂交瘤细胞株；3H6形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE-Cy3标记的兔抗小鼠k链

欧洲鳗鲡细胞系；EK形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgM

小鼠杂交瘤细胞株；CD127-2F8形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE-CY5标记的羊抗人IgM

小鼠杂交瘤细胞株；2G3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgG

花鲈脑细胞系；LMB-S形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Alexa Fluor 647标记的羊抗豚鼠IgG

小鼠杂交瘤细胞株；6G12形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE标记的羊抗豚鼠IgG

小鼠杂交瘤细胞株；PAG-H4形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgM

小鼠杂交瘤细胞株；PAG-G7形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE标记的兔抗豚鼠IgG

小鼠杂交瘤细胞株；5A3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长PE-CY5标记的兔抗羊IgM

小鼠杂交瘤细胞株；6B5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Alexa Fluor 555标记的兔抗小鼠IgG-Fc

小鼠杂交瘤细胞株；4G10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-GZMA Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株；3H8形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-CA3 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株；20F8形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-PRL Polyclonal Antibody
人原位胰腺腺癌细胞；BxPC-3价格猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒IL-10ELISAKIT产品规格:48T/96T。

猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒IL-10ELISAKIT产品规格:48T/96T。

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