客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

平脐儒孢菌CFD (Complement Factor D) ELISA Kit用途: 研究

猴头菌—50043复壮GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

甲酚斯鲁夫酵母TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Slooffia cresolica

产硫化物嗜盐碱红菌PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit拉丁属名: Natronorubrum sulfidifaciens

草酸青霉NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

黑曲霉ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus niger

圈卷产色链霉菌SLPI (Secretory Leukocyte Protease Inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces ansochromogenes

白乳菇12-HETE (12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

弗雷德里克斯堡假单胞菌CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas frederiksbergensis

苹果链格孢IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

土壤贪噬菌C/EBPα (CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha) ELISA Kit 拉丁属名: Variovorax ginsengisoli

蔷薇生链格孢C5 (Complement Component 5) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

芥黄蜜环菌VWF (Von Willebrand Factor) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

粗壮假丝酵母IRAK3 (Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 3) ELISA Kit拉丁属名: Candida valida
寄生水霉探针法荧光定量PCR试剂盒规格Anti-Connexin-45 间隙连接蛋白45Multi-class antibodies规格： 0.1ml

小鼠样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 进口/原装

小鼠样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit 特价促销

小鼠样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit 进口/原装

小鼠原(PI)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Proinsulin,PI ELISA Kit特价促销

小鼠自身(IAA)ELISA试剂盒英文名称：Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit进口/原装

IL-4 大鼠白介素-4Multi-class antibodies规格： 48T

Caspase-7 英文名称： 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7 0.1ml

Anti-GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit 人肺表面活性物质相关蛋白DMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-HPV16-E6 人类状瘤病毒16Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MCHR/GPR24 G蛋白偶联受体24 规格 0.1ml

CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶 96T

Phospho-Rictor (Thr1135) 英文名称： 磷酸化雷帕霉素靶蛋白复合体2 0.1ml

VGLL1 英文名称： 转录辅助因子退变样蛋白1 0.2ml

DENND2C 英文名称： MAP激酶激活死亡域蛋白2C 0.2ml

Anti-AQP3 水通道蛋白-3Multi-class antibodies规格： 0.1ml

EST1A 英文名称： 端粒酶结合蛋白EST1A 0.2ml

微管蛋白 Anti-Tubulin-α 0.1ml

Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 荧光素标记磷酸化酪氨酸激酶AIgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 磷酸化受体β 规格 0.1ml

Claudin 8 英文名称： 紧密连接蛋白8 0.2ml

Anti-GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三磷酸鸟苷环水解酶Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Cav-1(Human Caveolin-1) ELISA KIT 人窖蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-HER2(Tyr1248) 磷酸化HER2受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Microcephalin 1/BRIT1 小脑症基因1/认知相关蛋白 规格 0.2ml

cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人组织蛋白酶D 96T

RED 英文名称： 软相关蛋白2 0.2ml