客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

枯草芽孢杆菌GSTs (Glutathione S-Transferases) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

放线纤维菌VEGF (Vascular Endothelial Cell Growth Factor ) ELISA Kit 拉丁属名: Actinotalea sp.

球形芽孢杆菌PAF (Platelet Activating Factor) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  sphaericus

孔雀石褐链霉菌FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces malachitofuscus

鼠李糖乳杆菌GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  rhamnosus

蜡样芽孢杆菌ApoA4 (Apolipoprotein A4) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus

产气荚膜梭菌 毒素C型MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁属名: perfringens Type C

乳杆菌HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  sp.

紫丁香蘑LAB7-2/CD86 (B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

嗜热链球菌PON3 (Paraoxonase 3) ELISA Kit拉丁属名: Streptococcus  thermophilus

芽胞杆菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 用途: 分类、研究，具有作为动物益生菌、 饲料淀粉酶潜力。

谷氨酸棒杆菌NT-ProANP (N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 拉丁属名: Corynebacterium glutamicum

酿酒酵母SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

涎沫假丝酵母CD59 (Protectin) ELISA Kit 拉丁属名: Candida zeylanoides

英诺克李斯特菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 拉丁属名: Listeria innocua
马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Rhesus antibody Rh RbAp48 视网膜母细胞瘤结合蛋白P48 规格 0.2ml

Anti-OPN/FITC 荧光素标记骨桥蛋白IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Tenascin C (C terminal) 细胞粘合素(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GLUR2 谷氨酸受体2 规格 0.1ml

8-iso-PG ELISA Kit 大鼠8异素 96T

NDUFV2 英文名称： NADH脱氢酶黄素蛋白2 0.1ml

CARD15 英文名称： 凋亡加强结构域蛋白15 0.1ml

Anti-IL-1 Beta/IL-1B 白介素1βMulti-class antibodies规格： 0.1ml

AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit 人抗肌动蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IL-2 白介素2(大、小鼠)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LRP12 受体相关蛋白12(抑制蛋白7) 规格 0.2ml

GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人谷胱甘肽过氧化酶 96T

phospho-c-Raf(Ser43) 英文名称： 磷酸化原癌基因c-Raf 0.1ml

ADNP 英文名称： 活性依赖的神经保护肽 0.1ml

Anti-ABCG1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠ABCG1IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

SCFR ELISA Kit 大鼠干细胞因子受体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Ang- II /FITC 荧光素标记紧张素IIIgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAS/Apo-1/CD95 载脂蛋白A1 规格 0.1ml

CD44 ELISA Kit 大鼠CD44分子 96T

MUC5AC 英文名称： 胃粘液素 0.2ml

CKAP1 英文名称： 细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B 0.2ml

Anti-P73 protein P73抑制基因Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-OLFM1 嗅球蛋白1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Id1 DNA结合抑制因子1 规格 0.2ml

PCNA(Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖细胞核抗原 96T

PDCD10 英文名称： 凋亡相关蛋白10 0.2ml