PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

蘑菇COL9α3 (Collagen Type IX Alpha 3) ELISA Kit拉丁属名: Agaricus sp.

小单孢菌SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁属名: Micromonospora sp.

异配囊接霉TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: Mucor heterogamus

戴尔根霉VCL (Vinculin) ELISA Kit拉丁属名: Rhizopus  delemar

鲁考弗美奇酵母BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit拉丁属名: Metschnikowia  reukaufii

凝结芽孢杆菌ANXA2 (Annexin A2) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  coagulans

皱环球盖菇C1q (Complement 1q) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

栗色链霉菌LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces castaneus

禽脑脊髓炎病毒DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit拉丁属名: Avian       encephalomyetitis virus

假密环菌 拉丁属名：Armillaria mellea 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

烟色离褶伞 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Lyophyllum 种名加词：fumosum (Pers.) P.D. Orton 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教学 具体用途： 特征特性：子实体丛生一起，菌盖较小，直径1-5cm，半球形、扁半球形至平展，边缘或稍翻起，初期灰褐或暗灰褐色，渐变灰褐到浅灰褐色，表面近平滑。菌肉白色或污白色。菌褶直生或弯生于稍延生，不等长，密，白至污白色。菌柄近圆柱形，弯曲，长3-9cm，粗0.5-6μm。孢子近球形或宽椭圆形，无色，光滑，5.5-7.5μm×5-7.5μm。秋季生林中地上，多生于阔叶林或混交林中地上，有记载与树木形成菌根。

长柄大环柄菇 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Macrolepiota 种名加词：dolichaula (Berk. & Broome) Pegler & R.W. Rayner 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教学 具体用途： 特征特性：子实体中等至较大,菌盖扁半球形至扁平,具浅褐色细颗粒组成的鳞片,顶部鳞片密集,边缘鳞片少.菌肉白色,菌褶白色,袍密,离生,不等长,菌柄细长,圆柱形,白色,基部膨大 

酸鱼乳杆菌 拉丁属名：Lactobacillus acidipiscis 用途：研究； 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

弯曲芽孢杆菌 拉丁属名：Bacillus flexus 用途：研究；产果胶酶 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具体用途：产果胶酶 特征特性：菌落白色，不透明，边缘较规则，表面光滑。耐受8ug/ml Hg。菌落:圆、略干、鼓起、不透明、白、整齐、小。 

黄色微球菌 拉丁属名：Micrococcus flavus 用途：模式菌株 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

小马勃3-2 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Lycoperdon 种名加词：pusillum Batsch ex Pers. 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具体用途： 特征特性：子实体小。菌盖直径1～1.8cm，高达2cm，近球形，初期白色，后变土黄色及浅茶色，无基部，由根状菌丝索固定于基物上。外包被由细小易脱落的颗粒组成。内包被薄，光滑，成熟时*有小口，内部米黄色至浅茶色。孢子前黄色，近光滑，有时具短柄，球形，3～4µm。孢丝与孢子同色，分枝，粗3～4µm。

托拉斯假单胞菌 拉丁属名：Pseudomonas tolaasii 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

小孢根霉须状变种 拉丁属名：Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis 规格：冻干物 用途：产乳酸 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

脆弱拟杆菌 拉丁属名：Bacteroides fragilis 规格：冻干物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株:模式菌株 主要用途:分类；研究；教学 特征特性:杆菌，革兰氏阴性菌，专性厌氧、无芽胞、无动力、0.5×1.3～1.6微米。最适温度为37℃，最适ph值为7.0。生化反应弱，解糖，解酶反应阳性，葡萄糖的终末代谢产物有乙酸和琥珀酸；吲哚不定，耐胆盐，水解七叶灵。不还原硝酸盐。产生苹果酸盐脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、葡萄糖6磷酸脱氢酶（g6pdh）、6磷酸葡萄糖脱氢酶（6pgdh）、细胞壁粘肽层含有二氨基庚二酸。 

肝色牛排菌 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名 ： Fistulina 种名加词 ： hepatica (Schaeff.) With. 模式菌株 ： 非模式菌株 主要用途 ： 研究；教学 具体用途 ： 特征特性 ： 子实体中等大。肉质，有柄，软而多汁，半圆形，匙形或舌形，暗红色至红褐色。菌盖粘，有辐射状条纹及短柔毛，宽9-10cm。菌内厚，剖面可见条纹。子实层生菌管内。菌管各自可分离，无共同管壁 ，密集排列在菌肉下面。管口土黄色，后变为褐色。 

香菇LILRB4 (Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B Member 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

栗酒裂殖酵母LZM (Lysozyme) ELISA Kit拉丁属名: Schizosaccharomyces pombe

枯草芽孢杆菌CKLFSF7 (Chemokine Like Factor Superfamily 7) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

近缘毛壳EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 拉丁属名: Chaetomium subaffine

贪铜菌（加词待译）BACE1 (Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit用途: Utilizes benzene, chlorobenzene, 2,4-dichlorophenol, 2,6-dichlorophenol, phenol, toluene

大肠埃希菌PLG (Plasminogen) ELISA Kit拉丁属名: coli
马内菲青霉探针法荧光定量PCR试剂盒供应商Rhesus antibody Rh NEK8 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK8 规格 0.2ml

Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit 人C多肽 96T

Tsukushin 英文名称： TSK蛋白 0.2ml

CRTR1 英文名称： CP2相关转录抑制因子1 0.1ml

Anti-Doublecortin 双皮质素Multi-class antibodies规格： 0.1ml

兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称：Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit特价促销

兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA试剂盒 英文名称：Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit进口/原装

CA50 英文名称： 上皮类癌相关抗原 0.1ml

Anti-Phospho-PEA15 (Ser116) 磷酸化星形胶质细胞PEA15Multi-class antibodies规格： 0.1ml

CNX(Human calnexin) ELISA Kit 人钙联蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HER2 receptor(1A4) HER2受体单克隆 规格 0.1ml

LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit 小鼠苯丙酸 96T

PHOX2B 英文名称： 神经母细胞瘤蛋白PHOX2B 0.2ml

人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA试剂盒英文名称：Human epstein-barr virus IgM，EBv IgM ELISA Kit特价供应

人EJ/抗甘氨酰tRNA合成酶(EJ/GlyRS)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-EJ-antibody，EJ/GlyRS ELISA Kit进口/原装

IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Acinus AcinusMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser178) 磷酸化P27/周期素依赖激酶抑制剂 规格 0.1ml

狗IgG 干粉 10mg/50mg 国产

WDR23 英文名称： WDR23蛋白 0.2ml

CHD6 英文名称： ATP依赖的解旋酶CHD6 0.1ml

Anti-VWCE VWCEMulti-class antibodies规格： 0.2ml

PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生长因子BBMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5 Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆 规格 0.1ml

Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因 96T

RNF150 英文名称： 环指蛋白150 0.2ml