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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3871
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-17
- 更新日期: 2025-04-30
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3871 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
丝状支原体簇探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Mycoplasma mycoides cluster | LZR3871 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
柑橘炭疽刺盘孢PKCγ (Protein Kinase C Gamma) ELISA Kit 用途: 植物病原物,用于该菌种群遗传学研究
Bacillus methylotrophicusOGP (Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
泡盛曲霉CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
黑腐皮壳菌GSTθ2/GSTt2 (Glutathione S Transferase Theta 2) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
立枯丝核菌ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁属名: Thanatephorus cucumeris
美澳型核果褐腐病菌FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
细极链格孢ADCY1 (Adenylate Cyclase 1, Brain) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
芽孢杆菌属CNTNAP1 (Contactin Associated Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus sp.
吸水链霉菌吸水亚种S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces hygroscopicus
链格孢Ntn4 (Netrin 4) ELISA Kit拉丁属名: Alternaria alternata
产红青霉PLC (Phospholipase C) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium rubens
波茨坦短芽孢杆菌MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit拉丁属名: Brevibacillus borsensis
球孢白僵菌Bax (Bcl-2 Associated X Protein) ELISA Kit用途: 昆虫防治研究
聚生壳菌D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
水栖黄杆菌TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit拉丁属名: Flavobacterium aquidurense
丝状支原体簇探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Phospho-SRF (Ser77) 磷酸化生长激素释放因子抗体(血清应答因子)
TEF3/TEAD4 转录增强因子TEF3抗体
Transcription factor 25/Nulp1 核转录因子25抗体
PITX2 成对样同源结构域转录因子2抗体
RBM20 RNA结合蛋白20抗体
ZNF828/C13orf8 锌指蛋白828抗体
SPAC7/C13ORF28 精子顶端体相关蛋白7抗体