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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3863
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-17
- 更新日期: 2025-04-30
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3863 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
犬血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Mycoplasma haemocanis | LZR3863 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
围小丛壳菌C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit用途: 植物病原物,用于种群的遗传学研究和炭疽病害的诊断和防治
枯草芽孢杆菌CYP21B (Cytochrome P450 21B) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
红拟迷孔菌TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Daedaleopsis rubescens
枯草芽孢杆菌GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus subtilis
奥氏蜜环菌BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
香菇MAO (Monoamine Oxidase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
球毛壳LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium globosum
不吸水链霉菌MIγ/CXCL9 (Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces ahygroscopicus
鸭疫里氏杆菌α2-PI (α2-Plasmin Inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: anatipestifer
酿酒酵母FGγ (Fibrinogen Gamma) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
纳西杆菌属MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit拉丁属名: Naxibacter
平菇—新平1012IAPP (Islet Amyloid Polypeptide) ELISA Kit拉丁属名: Pleurotus ostreatus
长枝木霉DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
香菇ATF7 (Activating Transcription Factor 7) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
杨盘二孢菌*FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
犬血支原体探针法荧光定量PCR试剂盒说明书SERPINI2/PI14 蛋白酶抑制剂14抗体
CTH/CSE/Cystathionase 胱硫醚γ裂解酶抗体
ALAS2/ALAS-E 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
AMPD3 红细胞腺苷脱氨酶3抗体
AHSP/ERAF α红细胞分化相关因子抗体
BPGM 红细胞2,3 - 二磷酸甘油酸合成酶抗体
DYRK3 双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶3抗体