PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

苏云金芽胞杆菌CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit用途: 科研研究

黑木耳CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

阿布拉链霉菌除瘟变种STAT6 (Signal Transducer and Activator of Transcription 6) ELISA Kit 用途: 分类 研究

锰氧化褐黄海水菌PKN1 (Protein Kinase N1) ELISA Kit 拉丁属名: Fulvimarina manganoxydans

单孢哈萨克斯坦酵母TLA (Thymus Leukemia Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Kazachstania unispora

芽孢杆菌TLN (Talin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

无花果奇异球菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit  拉丁属名: Deinococcus ficus

芸薹链格孢（可订）AMA IgA (Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

谢氏酸杆菌GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 能够耐受2mM的重金属Zn2+

蛹虫草(北冬虫夏草，北虫草)GIP (Glucose Dependent Insulin Releasing Polypeptide) ELISA Kit拉丁属名: Cordyceps  militaris

嗜盐栖盐水芽孢杆菌AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit拉丁属名: Salsuginibacillus halophilus

肠道致病性大肠埃希氏菌PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia  coli EPEC O 127 : K63

虎掌菌1号*COLEC11 (Collectin Sub-Family Member 11) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

德里腐霉NE/ELA2 (Elastase 2, Neutrophil) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

林芝假丝酵母TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit拉丁属名: Candida linzhiensis
小孢子菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 COPS6  信号转导蛋白亚基6抗体凤仙萜四醇苷Kb-D-Glucopyranoside,(1R,2S,4aR,4bR,6'S,6aR,7R,8S,10aR,10bR,12aS)-7-[(b-D-glucopyranosyloxy)methyl]-6'-[(1S)-2-(b-D-glucopyranosyloxy)-1-methylethyl]octadecahydro-1-hydroxy-4a,4b,7,10a-tetramethylspiro[chrysene-2(1H),3'(4'H)-[2H]pyran]-8-yl2-O-b-D-glucopyranosyl- (9CI)化学标准品 分 子 式: C54H92O25 分 子 量:

FBXO21  F-box蛋白21抗体山茱萸苷cornin中药标准品  分 子 式: C17H24O10 分 子 量: 388.36646

FBXO38  F-box蛋白38抗体丹皮酚磺酸钠4-Ethyl-4-methylpiperidine-2,6-dione中药标准品  分 子 式: C8H13NO2 分 子 量: 155.19432

COPS4  信号转导蛋白亚基4抗体4-松油醇Terpinen-4-ol化学标准品 分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.25

COPS7A  信号转导蛋白亚基7A抗体甲醛凝胶加样缓冲液(10×,RNase free)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

COPS2/TRIP15  甲状腺受体相互作用蛋白15抗体抗荧光淬灭封片剂标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GPS1/CSN1  G蛋白通路抑制蛋白1抗体鸡蛋花甙Spiro[cyclopenta[c]pyran-7(1H),2'(5'H)-furan]-4-carboxylicacid, 1-(b-D-glucopyranosyloxy)-4a,7a-dihydro-4'-[(1S)-1-hydroxyethyl]-5'-oxo-,methyl ester, (1S,2'R,4aS,7aS)-对照药材 分 子 式: C21H26O12 分 子 量: 470.42394