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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3805
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-07
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3805 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
梅克尔多元癌细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | Merkel Cell Polyomavirus(MCPyV) | LZR3805 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
球形赖氨酸芽孢杆菌CKB (Creatine Kinase, Brain) ELISA Kit拉丁属名: Lysinibacillus sphaericus
蚜虫莫氏黑粉菌 SIGLEC12 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 12) ELISA Kit拉丁属名: Moesziomyces aphidis
金黄色葡萄球菌RPS6Kβ1 (Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit拉丁属名: Staphylococcus aureus
纳西杆菌属GNLY (Granulysin) ELISA Kit拉丁属名: Naxibacter
金乳牛肝菌PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
美澳型核果褐腐病菌CK-13/KRT13 (Cytokeratin 13) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
美澳型核果褐腐病菌PTD (Pentosidine) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
门多萨假单胞菌CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas mendocina
蜡样芽孢杆菌VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus cereus
热带假丝酵母Thyronine ELISA Kit用途: 用烷烃 饲料酵母
粉红聚端孢霉CRLF1 (Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
暗褐色毛霉COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit拉丁属名: Mucor fuscus
枯草芽孢杆菌APP (Amyloid Precursor Protein) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
三叶草根瘤菌FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
杰丁毕赤酵母ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Pichia jadinii
梅克尔多元癌细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 FBXO24 FBXO24蛋白抗体碱性品红水溶液(1%)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
hnRNP A2B1 异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体藜芦醇Veratryl alcohol中药标准品 分 子 式: C9H12O3 分 子 量: 168.18978
hnRNP U 异质核糖核蛋白U抗体豆腐果新苷BHelicianeoide B化学标准品 分 子 式: C32H38O20 分 子 量: 742.632120000001
AIM1L 缺失样蛋白1抗体γ-倒捻子素1,3,6,7-Tetrahydroxy-2,8-bis(3-methylbut-2-en-1-yl)-9H-xanthen-9-one化学标准品 分 子 式: C23H24O6 分 子 量: 396.43306
AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗体山梨醇溶液(1mol/L)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗体丹参醇BTanshinol B化学标准品 分 子 式: 分 子 量:
AER61 未知糖基化转移酶AER61抗体莨菪碱L-Hyoscyamine中药标准品 分 子 式: C17H23NO3 分 子 量: 289.37