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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3790
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-08
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3790 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
葡萄糖苷曼氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | Mannheimia glucosida | LZR3790 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
米氏假单胞菌PKCβ1 (Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas migulae
糙皮侧耳UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit用途: 日本菌株,食用
砖红镰孢NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
藤黄交替红色杆菌TP5 (Thymopentin) ELISA Kit拉丁属名: Altererythrobacter luteolus
烟曲霉STAT4 (Signal Transducer and Activator of Transcription 4) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Marivita litoreaUBD (Ubiquitin D) ELISA Kit拉丁属名: Marivita litorea
长双歧杆菌UCRP (Ubiquitin Cross Reactive Protein) ELISA Kit拉丁属名: Bifidobacterium longum
PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus aryabhattai Shivaji et al.
大肠杆菌属CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli
慢生根瘤菌MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 用途: 与胡枝子共生固氮
炭疽芽胞杆菌SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 拉丁属名: anthracis
嗜冷杆菌属TSPAN30 (Tetraspanin 30) ELISA Kit拉丁属名: Psychrobacter sp.
杏鲍菇DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
白灵菇ADAM9 (A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
病研所芽孢杆菌Anti-CIIAb (Anti-Type II Collagen Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus idriensis
葡萄糖苷曼氏杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格Annexin Ⅲ 膜粘连蛋白A3抗体喜树碱Camptothecine 高端化学试剂 分 子 式: C20H16N2O4 分 子 量: 348.36
Annexin IV 膜粘连蛋白 A4抗体多聚甲醛-戊二醛混合固定液(2%/2.5%)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
BZW2 BZW2蛋白抗体鹅掌楸碱spermatheridin对照药材 分 子 式: C17H9NO3 分 子 量: 275.25826
TPH2 5色氨酸羟化酶2抗体水合氧化前胡素Oxypeucedanin hydrate中药标准品 分 子 式: C16H16O6 分 子 量: 304.29464
Annexin V 膜粘连蛋白5抗体小连翘次碱,角茴香酮碱(+/-)-hypecorinine化学标准品 分 子 式: C20H17NO6 分 子 量: 367.352
Annexin A9 膜粘连蛋白9抗体27-对香豆酰氧基熊果酸27-p-Coumaroyloxyursolic acid对照药材 分 子 式: C39H54O6 分 子 量: 618.84246
Annexin A10/14 膜粘连蛋白10抗体硫代硫酸钠溶液(5%)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: