客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

地霉半乳糖酵母Monkey PLCγ2 (Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit拉丁属名: Galactomyces geotrichum

德氏乳杆菌保加利亚亚种Monkey FAIM3 (Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

明尼苏达被毛孢Monkey EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 拉丁属名: Hirsula minnesotensis

Novosphingobium panipatenseMonkey IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 拉丁属名: Novosphingobium panipatense

杂色曲霉Monkey IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母Monkey NUP35 (Nucleoporin 35kDa) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

中国毛霉Monkey PLCβ1/PI-PLC (Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific) ELISA Kit拉丁属名: Mucor sinensis

大肠埃希氏菌Monkey MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

微黄八叠球菌Monkey SOX1 (Sex Determining Region Y Box Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Sarcina  sp.

韩国生孢八叠球菌Monkey ELMO2 (Engulfment And Cell Motility 2) ELISA Kit 拉丁属名: Sporosarcina koreensis

贪噬菌属Monkey FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁属名: Variovorax  ginsengisoli

红球菌Monkey CK-LMW (Cytokeratin Low Molecular Weight) ELISA Kit拉丁属名: Rhodococcus sp.

季也蒙毕赤酵母Monkey PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁属名: Pichia  guilliermondii

栖泥盐盐八叠球菌Monkey PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit拉丁属名: Halosarcina limi

布氏假单胞菌Monkey GPC4 (Glypican 4) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas  brenneri
硕大利什曼原虫探针法荧光定量PCR试剂盒说明书FKSG14/Centromere protein K  着丝粒蛋白K牡荆内酯Vitexilactone中药标准品  分 子 式: C22H34O5 分 子 量: 378.50236

FNDC1  Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1罗斯试剂(Rous Reagent)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

MX2/MXB  干扰素诱导GTP结合蛋白MX2抗体二十三酸TRICOSANOIC ACID化学标准品 分 子 式: C23H46O2 分 子 量: 354.61014

APLP2  淀粉样蛋白β前体样蛋白2抗体日蟾毒它灵中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

ZNF804A  锌指蛋白804A抗体二氢愈创木脂酸Dihydroguaiaretic-acid对照药材 分 子 式: C20H26O4 分 子 量: 330.41804

SENP5  泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶5抗体5-甲氧基山奈酚; 5-甲氧基莰非醇4H-1-Benzopyran-4-one, 3,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-5-methoxy-化学标准品 分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288

APLP1  淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体异阿魏酸3-(3-Hydroxy-4-methoxyphenyl)acrylic acid中药标准品  分 子 式: C10H10O4 分 子 量: 194.184