上海联祖生物科技有限公司
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脾肾坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3746
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-09
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3746
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

脾肾坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒规格

Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )

LZR3746

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

香栓孔菌Monkey FSCN (Fascin) ELISA Kit拉丁属名: Trametes suaveolens

耐盐考克氏菌Monkey COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁属名: Kocuria  halotolerans

地下盐单胞菌Monkey MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁属名: Halomonas subterranea

苏云金芽孢杆菌Monkey DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit用途: 害虫生物防治

壳菌Monkey TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

变粉红锁掷孢酵母Monkey TDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁属名: Sporidiobolus metaroseus

污黑腐皮壳Monkey GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

类干酪乳杆菌Monkey PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus  paracasei

金黄色葡萄球菌Monkey LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit拉丁属名: Staphylococcus aureus

红色雷夫松氏菌Monkey NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁属名: Leifsonia rubra

水生拉恩氏菌Monkey ACVA (Activin A) ELISA Kit拉丁属名: Rahnella aquatilis

博韦环纹炭团菌Monkey SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁属名: Annulohypoxylon bovei

酿酒酵母Monkey C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

大肠埃希氏杆菌Monkey GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia  coli

中国木霉Monkey LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁属名: T.sinensis
脾肾坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒规格HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗体康普瑞汀A-1(Z)-3-Methoxy-6-(3,4,5-trimethoxystyryl)benzene-1,2-diol中药标准品  分 子 式: C18H20O6 分 子 量: 332.3478

HDHD3  HDHD3蛋白抗体前杯苋甾酮Stigmast-7-en-26-oicacid, 2,3,14,20,22,28-hexahydroxy-6-oxo-, d-lactone, (2b,3b,5b,22R,24S,25S,28R)-中药标准品  分 子 式: C29H44O8 分 子 量:

HDHD2B/LHPP  HDHD2B蛋白抗体辛弗林盐酸盐4-(1-Hydroxy-2-(methylamino)ethyl)phenol hydrochloride中药标准品  分 子 式: C9H13NO2.HCl 分 子 量: 203.66596

HEATR3  HEATR3蛋白抗体13-羟基氧化小檗碱13-Hydroxyoxyberberine化学标准品 分 子 式:  分 子 量:

HEATR6  增强蛋白抗体醋酸辛酯Octyl acetate中药标准品  分 子 式: C10H20O2 分 子 量: 172.27

Proteasome 19S S5A  26S蛋白酶调节亚型S*抗体磺胺乙酰钠Sulfacetamide sodium化学标准品 分 子 式: C8H9N2NaO3S 分 子 量: 236.22

Headpin/SERPINB13  丝氨酸蛋白酶抑制剂13抗体球松素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenylchroman-4-one对照药材 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.27996

 


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