上海联祖生物科技有限公司
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锦鲤病毒基因探针法荧光定量PCR试剂盒供应商
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3756
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-09
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3756
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

锦鲤病毒基因探针法荧光定量PCR试剂盒供应商

Koi Herpesvirus(KHV)Sph

LZR3756

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

丝状支原体山羊亚种Monkey NT-3 (Neurotrophin-3) ELISA Kit 拉丁属名: mycoides       subsp capri

晶粒鬼伞Monkey PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

青色链霉菌Monkey NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces glaucus

青霉Monkey HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

血杆菌Monkey MIγ/CXCL9 (Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit拉丁属名: Sanguibacter sp.

三叶胶灰星菌Monkey NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

假灰链霉菌Monkey PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces pseudogriseolus

佛雷德里克斯堡假单胞菌Monkey GM (Gastric Mucin) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas  frederiksbergensis

戴尔福特菌属Monkey TD-Ag (Thymus Dependent Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Delftia  sp.

大肠埃希氏菌Monkey MCSP (Melanoma Associated Chondroitin Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

长根静灰球菌Monkey CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

虎掌菌*Monkey PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

枯草芽孢杆菌Monkey AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus  subtilis

病毒Monkey cTnT/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit拉丁属名: Infectious       bronchitis virus

FormosaMonkey Ank-B (Ankyrin B) ELISA Kit拉丁属名: Formosa sp.
锦鲤病毒基因探针法荧光定量PCR试剂盒供应商UBE2U  泛素蛋白连接酶U抗体二苯胺试剂(1%)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

UBE2W  泛素蛋白连接酶W抗体皂草苷; 皂草黄苷4H-1-Benzopyran-4-one,6-b-D-glucopyranosyl-7-(b-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-化学标准品 分 子 式: C27H30O15 分 子 量:

CBLL1/Ecadherin binding protein E7  上皮钙粘附分子结合蛋白E77-木糖苷儿茶酚2-[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5-dihydroxy-chroman-7-yl]oxyoxane-3,4,5-triol对照药材 分 子 式: C20H22O10 分 子 量: 422.38268

BTRC2/beta TRCP2  BTRC2蛋白抗体水飞蓟汀Silicristin中药标准品  分 子 式: C25H22O10 分 子 量: 482.44

WDR23  WDR23蛋白抗体戈米辛O6-epi-gomisin O化学标准品 分 子 式: C23H28O7 分 子 量: 416.46422

SKP1  S期激酶相关蛋白1抗体黄卡瓦胡椒素 A1-(2-Hydroxy-4,6-dimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)prop-2-en-1-one对照药材 分 子 式: C18H18O5 分 子 量: 314.33252

SHFM3  SHFM3蛋白抗体山栀子苷Bgardenoside中药标准品  分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.37

 


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