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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3669
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-12
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3669 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
嗜血杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | Haemophilus spp. | LZR3669 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
扣囊复膜孢酵母Monkey LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomycopsis fibuligera
宇佐美曲霉Monkey ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus usamii
黑曲霉Monkey c-jun ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus niger
枯草芽胞杆菌Monkey Fcγ (Fc Fragment of IgG) ELISA Kit 拉丁属名: subtilis
盔状毕赤酵母Monkey ATF-2 (Activating Transcription Factor 2) ELISA Kit 拉丁属名: Pichia galeiformis
大肠埃希菌Monkey NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit拉丁属名: coli
嗜冷生孢八叠球菌Monkey MAG (Myelin Associated Glycoprotein) ELISA Kit拉丁属名: Sporosarcina psychrophila
发根土壤杆菌(发根植物单胞菌)(现1)Monkey NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit 拉丁属名: Agrobacterium rhizogenes(Riker et al.)Conn
灰毛青霉Monkey Ras-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
褐黄木耳(琥珀木耳)Monkey EPYC (Epiphycan) ELISA Kit拉丁属名: Auricularia fuscosuccinea
Paenibacillus thailandensisMonkey TS/TYMS (Thymidylate Synthetase) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus thailandensis
柄篮状菌Monkey ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit拉丁属名: Talaromyces stipitatus
巨大芽孢杆菌Monkey ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus megaterium
解淀粉芽孢杆菌Monkey IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus amyloliquefaciens
鸡油菌Monkey IGFBP-5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
嗜血杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 DPEP3 膜二肽酶3抗体人参环氧炔醇1-Octene-4,6-diyn-3-ol,8-[(2R,3S)-3-heptyl-2-oxiranyl]-, (3R)-化学标准品 分 子 式: C17H24O2 分 子 量:
DSN1 着丝粒相关蛋白DSN1抗体罗汉果皂苷ⅡA2b-D-Glucopyranoside, (3b,9b,10a,11a,24R)-11,24,25-trihydroxy-9-methyl-19-norlanost-5-en-3-yl6-O-b-D-glucopyranosyl- (9CI)中药标准品 分 子 式: C42H72O14 分 子 量: 801.01268
DUSP13 双特异性磷酸酶13抗体胡黄连苷II6-Vanilloylcatalpol中药标准品 分 子 式: C23H28O13 分 子 量: 512.46062
Flotillin 1 脂阀结构蛋白1抗体苦蒿素2(5H)-Furanone,4-[2-[(1S,2R,4aS,7S,8aR)-4a-[(acetyloxy)methyl]-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydro-7-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-1,2-dimethyl-1-naphthalenyl]ethyl]-中药标准品 分 子 式: C22H32O6 分 子 量:
GAJ/MND1 减数分裂核分裂蛋白1抗体苏式-1-C-丁香酚基丙三醇1,2,3-Propanetriol,1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-, (1R,2R)-rel-对照药材 分 子 式: C11H16O6 分 子 量: 244.24114
GLP2R 胰素样肽2受体抗体半枝莲碱Scutebarbatine A中药标准品 分 子 式: C32H34N2O7 分 子 量: 558.6
AMPK beta 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体血竭素高氯酸盐DRACORHODIN PEROCHLORATE中药标准品 分 子 式: C17H15O3+.CH4 分 子 量: 283.34166