PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

拉曼伞状霉Monkey RHOB (Ras Homolog Gene Family, Memmber B) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌Monkey GARS (Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

中国葡萄座腔菌Monkey GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 拉丁属名: Botryosphaeria sinensia

茶拟茎点霉Monkey CYPA (Cyclophilin A) ELISA Kit拉丁属名: Phomopsis theae Petch

隐红碱线菌Monkey MART/Melan-A (Melanoma Marker A) ELISA Kit拉丁属名: Natrinema  pellirubrum

硫磺菌Monkey EMA (Epithelial Membrane Antigen) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

北方蜜环菌Monkey COL11α1 (Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit 用途: 食用菌

地衣芽孢杆菌Monkey PLB (Phospholipase B) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

西蕃莲茎基腐病Monkey CRN (Corin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

大肠埃希菌Monkey BLC (B-Lymphocyte Chemoattractant) ELISA Kit拉丁属名: coli

雅致小克银汉霉Monkey PRCP (Prolylcarboxypeptidase) ELISA Kit 拉丁属名: Cunninghamella elegans

黄柄曲霉Monkey D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus flavipes

栖土曲霉Monkey GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus terricola

黑化链霉菌Monkey ESF (Erythropoiesis Stimulating Factor) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces nigrificans

环带毛霉Monkey RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Mucor zonatus
副猪嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CDC123/C10orf7  细胞分裂周期蛋白CDC123抗体萝芙木明碱(16xi,17R,21alpha)-21-hydroxyajmalan-17-yl 3,4,5-trimethoxybenzoate化学标准品 分 子 式: C30H36N2O6 分 子 量: 520.6166

CCDC16/zinc finger protein 830  锌指蛋白830抗体22-脱氢赤桐甾醇葡糖苷b-D-Glucopyranoside, (3b,22E,24S)-stigmasta-5,22,25-trien-3-yl(9CI)对照药材 分 子 式: C35H56O6 分 子 量:

CDC20B  细胞分裂周期蛋白20B抗体秦皮素啶2H-1-Benzopyran-2-one,8-hydroxy-6,7-dimethoxy-对照药材 分 子 式: C11H10O5 分 子 量:

ccnb1ip1  周期蛋白B1结合蛋白1抗体L-胱氨酸L-Cystine氨基酸类 分 子 式: C6H12N2O4S2 分 子 量: 240.30048

CDC45L  细胞分裂周期调控蛋白45抗体黄卡瓦胡椒素C2',4-DIHYDROXY-4',6'-DIMETHOXYCHALCONE化学标准品 分 子 式:  分 子 量:

CDCA2  细胞分裂周期蛋白2抗体去氢木香内酯Dehydrocostus lactone中药标准品  分 子 式: C15H18O2 分 子 量: 230.3

CEP152  中心体蛋白152抗体桑根酮DSanggenon D中药标准品  分 子 式: C40H36O12 分 子 量: 708.70664