客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

弗氏链霉菌Monkey CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces fradiae

天花板节杆菌Monkey CLDN9 (Claudin 9) ELISA Kit 拉丁属名: Arthrobacter tecti

亚黑管孔菌Monkey NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型Monkey PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母Monkey LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

美澳型核果褐腐病菌Monkey FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Monilinia fructicola

产皮欧(票)霉素链霉菌Monkey ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces   piomogenes

奥氏蜜环菌Monkey PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母Monkey Neopterin ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae Hansen

石泉海源菌Monkey sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁属名: Idiomarina fontislapidosi

猴假单胞菌Monkey FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas simiae

盐渍喜盐芽孢杆菌Monkey LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 拉丁属名: Halobacillus salinus

聚团屈挠杆菌Monkey MYC (V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit拉丁属名: Flexibacter  tractuosus

菊池链格孢Monkey NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

弗雷德里克斯堡假单胞菌Monkey AP62A (Anti-P62 Antibody)  ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas  frederiksbergensis
阿古尼嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒供应商ASB3  锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体Sorensen磷酸缓冲液(1×,pH6.2)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EIF2C1/Ago1  真核翻译起始因子2C1抗体乙酸钠溶液(3mol/L,pH6.0,无菌)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Anillin  胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体pH标准缓冲溶液(pH=4.00)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

BIN3  细胞骨架衔接蛋白BIN3抗体丁香亭-3-O-葡糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-化学标准品 分 子 式: C23H24O13 分 子 量: 508.42886

CCDC11  卷曲螺旋结构域蛋白11抗体雌三醇 3-葡萄糖醛酸苷b-D-Glucopyranosiduronic acid, (16a,17b)-16,17-dihydroxyestra-1,3,5(10)-trien-3-yl化学标准品 分 子 式: C24H32O9 分 子 量:

CDC3/CDC10/Septin 7  细胞周期调控因子3抗体三甲基氯化锡Trimethyltin chloride化学标准品 分 子 式: C3H9ClSn 分 子 量: 199.27

CEP55  中心体蛋白55kDa抗体胰蛋白酶溶液(0.1%)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: