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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3691
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-14
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3691 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
肝胰腺细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Hepatopancreatic Parvovirus(HPV) | LZR3691 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
FlavobacteriumMonkey CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18) ELISA Kit拉丁属名: Flavobacterium terriphilum
微红微球菌Monkey BF (Factor B) ELISA Kit拉丁属名: Rubellimicrobium roseum
根瘤菌属Monkey MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Rhizobium sp.
粪产碱菌粪亚种Monkey CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit 拉丁属名: Alcaligenes faecalis subsp. faecalis
异常毕赤酵母Monkey PTD (Pentosidine) ELISA Kit拉丁属名: Pichia anomala
大肠埃希氏菌Monkey Smad3/MADH3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli
气生马赛菌Monkey GRβ (Glucocorticoid Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Massilia aerilata
褐橙指孢囊菌Monkey CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit拉丁属名: Dactylosporangium fuscoaurantiacum
鸭疫里氏杆菌Monkey CCKBR (Cholecystokinin B Receptor) ELISA Kit拉丁属名: anatipestifer
灰色链霉菌Monkey KAF (Keratinocyte Autocrine Factor) ELISA Kit用途: 产生代谢产物具有抑菌活性
胶冻样芽胞杆菌Monkey GDH/GLDH (Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit用途: 肥
沙福芽孢杆菌Monkey PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus safensis
海小单孢菌Monkey LN (Laminin) ELISA Kit拉丁属名: Micromonospora marina
阿氏芽孢杆菌Monkey IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus aryabhattai
木荷生德克斯酵母Monkey CENPF (Centromere Protein F) ELISA Kit 拉丁属名: Derxomyces schimicola
肝胰腺细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书phospho-NIFK/MKI67IP(Thr234) 磷酸化KI67相互作用蛋白抗体罗汉松黄酮 A.4H-1-Benzopyran-4-one,8-[5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-1-benzopyran-2-yl)-2-hydroxyphenyl]-5,7-dihydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-对照药材 分 子 式: C31H20O10 分 子 量:
TACC1 、抗原GA55抗体槲皮素-3-D-木糖甙4H-1-Benzopyran-4-one,2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-(b-D-xylopyranosyloxy)-对照药材 分 子 式: C20H18O11 分 子 量: 434.35032
ABCF3 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白F亚基3抗体蛇床子素7-Methoxy-8-(3-methyl-2-buten-1-yl)-2H-chromen-2-one中药标准品 分 子 式: C15H16O3 分 子 量: 244.28574
ABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗体6-甲氧基当归素2H-Furo(2,3-h)-1-benzopyran-2-one, 6-methoxy-对照药材 分 子 式: C12H8O4 分 子 量: 216.18952
ABHD13 水解酶结构域蛋白13抗体醉鱼草皂苷IVbb-D-Galactopyranoside, (3b,4a,16b)-16,23,28-trihydroxyoleana-11,13(18)-dien-3-yl O-b-D-glucopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®3)]-6-deoxy-化学标准品 分 子 式: C48H78O18 分 子 量:
ABHD14B 水解酶结构域蛋白14B抗体罗汉果苷IIIMogroside III中药标准品 分 子 式: C48H82O19 分 子 量: 963.15328
ABHD15 水解酶结构域蛋白15抗体皂化液标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: