客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

炭黑曲霉Monkey FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  carbonarius

褪色沙雷氏菌（粘质沙雷氏菌）Monkey PK2 (Prokineticin 2) ELISA Kit 拉丁属名: Serratia marcescens

相思根瘤菌Monkey CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

鸭疫里氏杆菌Monkey c-myc (c-myc Oncogene Product) ELISA Kit拉丁属名: anatipestifer

黄杆菌Monkey STK39 (Serine/Threonine Kinase 39) ELISA Kit拉丁属名: Flavobacterium piscis

酿酒酵母Monkey PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

鸭疫里氏杆菌Monkey Pg (Progesterone) ELISA Kit拉丁属名: anatipestifer

异常汉逊酵母异常变种Monkey TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Hansenula  anomala var. anomala

掷孢酵母Monkey EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

卷柄根霉Monkey PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain ) ELISA Kit 拉丁属名: Rhizopus circinans

枯草芽孢杆菌Monkey GSTα5 (Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus  subtilis

肿痂链霉菌Monkey ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces turgidiscabies

奥氏蜜环菌Monkey HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

克雷伯氏菌Monkey GPC2 (Glypican 2) ELISA Kit 规格: 冻干粉

黑曲霉Monkey CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  niger
病毒前基因组探针法荧光定量PCR试剂盒说明书ALOXE3  表皮型脂氧合酶3抗体（相关蛋白）圆叶肿柄菊素 FPropanoic acid,2-methyl-,(3aR,4R,6R,9R,10Z,11aR)-2,3,3a,4,5,6,9,11a-octahydro-9-hydroxy-6,10-dimethyl-3-methylene-2-oxo-6,9-epoxycyclodeca[b]furan-4-ylester对照药材 分 子 式: C19H24O6 分 子 量: 348.39026

ALPK3  α蛋白激酶3抗体（心肌）D-松醇D-Pinitol中药标准品  分 子 式: C7H14O6 分 子 量: 194.18246

CEND1  细胞周期通道和神经细胞分化蛋白1抗体西瑞香素Daphnoretin中药标准品  分 子 式: C19H12O7 分 子 量:

DHRS9  短链脱氢酶/还原酶家族9抗体别隐品碱ALLOCRYPTOPINE中药标准品  分 子 式: C21H23NO5 分 子 量: 369.41

DLL3  Notch信号通路Delta样配体3抗体龙血素ALoureirin A中药标准品  分 子 式: C17H18O4 分 子 量: 286.325

EME1  减数分裂内切酶EME1抗体姜状三七苷R13β-[(2-O-β-D-Glucopyranosyl-β-D-glucopyranuronosyl)oxy]oleana-12-ene-28-oic acid化学标准品 分 子 式: C42H66O14 分 子 量: 794.96504

FAM3C/ILEI  上皮分泌型FAM3C蛋白抗体硫酸软骨素Chondroitin Sulphate中药标准品  分 子 式: (C14H21NO14S)N 分 子 量: