上海联祖生物科技有限公司
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嗜血杆菌型探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3663
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-15
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3663
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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英文名称

货号

嗜血杆菌型探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Haemophilus influenzae BB

LZR3663

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

枯草芽孢杆菌Monkey AP (Aprotinin) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  subtilis

桔青霉Monkey TR (Targeted Ribonuclease) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium  citrinum

灭蚊链霉菌Monkey IL-2Rβ (Interleukin 2 Receptor Beta) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces culicidicus

粪肠球菌(粪链球菌)Monkey CA3 (Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific) ELISA Kit拉丁属名: Enterococcus faecalis =Streptococcus faecalis

星座链球菌星座亚种Monkey MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit拉丁属名: Streptococcus conslatus subsp. conslatus

深绿木霉Monkey DA (Dopamine) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma atroviride

慢生根瘤菌Monkey PCDHγA2 (Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit 用途: 与胡枝子共生固氮

嗜松青霉Monkey C5 (Complement Component 5) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium pinophilum

胶孢Monkey RGS4 (Regulator of G Protein Signaling 4) ELISA Kit 用途: 植物病原物,用于种群的遗传学研究和炭疽病害的诊断和防治

大肠埃希氏菌宿主Monkey CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia  coli

美澳型核果褐腐病菌Monkey CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Monilinia fructicola

灰略红链霉菌Monkey NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces griseorubens

棱柱散尾菌中华变型Monkey REG1β (Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta) ELISA Kit 用途: 药用

日内瓦毛霉Monkey NLR (NOD-Like Receptor9) ELISA Kit拉丁属名: Mucor genevensis

朱红栓菌Monkey CaN (Calcineurin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
嗜血杆菌型探针法荧光定量PCR试剂盒说明书phospho-TRIM25(Ser100)  磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体TES缓冲液(1×,pH7.5)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

KLHL9  kelch样蛋白9抗体绣线菊碱 FSpiradine F对照药材 分 子 式: C24H33NO4 分 子 量: 399.52312

MKKS/BBS6  巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体正十二烷酸巨大戟酯Dodecanoic acid ingenol ester中药标准品  分 子 式: C32H50O7 分 子 量: 546.7352

MSF/Cell division control protein septin D1  细胞周期调控蛋白D1抗体泻根醇酸26-Norolean-8-en-29-oicacid, 3-hydroxy-13-methyl-, (3b,13a,14b,20b)-对照药材 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.70032

MyoGEF  肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体赛门苷Ib-D-Glucopyranoside, (3b,9b,10a,11a,24R)-3-(b-D-glucopyranosyloxy)-11,25-dihydroxy-9-methyl-19-norlanost-5-en-24-ylO-b-D-glucopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®6)]-中药标准品  分 子 式: C54H92O24 分 子 量:

NAT10  乙酰基转移酶10抗体莲心碱Liensinine中药标准品  分 子 式: C37H42N2O6 分 子 量: 610.74

NEK7  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Nek7抗体四氢丹参酮 IPhenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione,1,2,8,9-tetrahydro-1,6-dimethyl-化学标准品 分 子 式: C18H16O3 分 子 量: 280.31784

 


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