客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

阴沟肠杆菌Monkey GMP-140 (Alpha-granular Membrane Protein) ELISA Kit拉丁属名: Enterobacter  cloacae

枯草芽孢杆菌Monkey DAG1 (Dystrophin Associated Glycoprotein 1) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

汉塔成对杆菌Monkey PAEP (Progestagen-Associated Endometrial Protein) ELISA Kit拉丁属名: Dyadobacter hamtensis

纺锤状链霉菌Monkey LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces netropsis

稻平脐蠕孢Monkey CX37 (Connexin 37) ELISA Kit 拉丁属名: Bipolaris oryzae

贝酵母Monkey C/EBPε (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Epsilon) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces bayanus

伯克霍尔德氏菌属Monkey MAP2K6/MKK6 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 6) ELISA Kit拉丁属名: Burkholderia  sp.

酿酒酵母Monkey PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

枯草芽孢杆菌Monkey γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

厚孢根霉Monkey AP (Allopregnanolone) ELISA Kit用途: 产延胡索酸

枯草芽孢杆菌Monkey CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus subtilis

HymenobacterMonkey SSRP1 (Structure Specific Recognition Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Hymenobacter sp.

瑞士乳杆菌Monkey Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus  helveticus

豇豆慢生根瘤菌Monkey ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit用途: 与绿叶、银叶山蚂蝗共生固氮

酿酒酵母Monkey THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
鹅细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒供应商LAP3  亮氨酸氨基肽酶3抗体D-酒石酸(2S,3S)-2,3-Dihydroxysuccinic acid中药标准品  分 子 式: C4H6O6 分 子 量: 150.08684

LMW Kininogen/Kininogen 1  低分子量生长促进因子抗体（激肽原1）青藤碱Sinomenine中药标准品  分 子 式: C19H23NO4 分 子 量: 329.39

KCNMB1/Maxi Potassium channel beta  钙激活钾通道蛋白β1抗体莪术烯醇Curcumenol中药标准品  分 子 式: C15H22O2 分 子 量: 234.33398

P2RX4  三磷酸腺苷门控阳离子通道蛋白抗体枸橼酸血根碱中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

ATP6IP2  ATP酶H+转运溶酶体辅助蛋白2抗体pH标准缓冲溶液(pH=6.86)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Relaxin 1  松弛肽/松弛素抗体环桑色烯Cyclomulberrochromene对照药材 分 子 式: C25H22O6 分 子 量: 418.43858

Renalase  肾胺酶抗体鸦胆亭Bruceantin化学标准品 分 子 式: C28H36O11 分 子 量: 548.57884