客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

费尔氏酵母GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁属名: Fellomyces borneensis

酿酒酵母Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

大毛霉GA (Glycated Albumin) ELISA Kit拉丁属名: Mucor mucedo

稻田弯曲嗜酸菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces mauvecolor

朱黄篮状菌ENG/CD105 (Endoglin) ELISA Kit拉丁属名: Talaromyces minioluteus

胶孢CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

小孢根霉须状变种AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit拉丁属名: Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis

假单胞菌属L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas  reinekei

新城疫病毒CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit拉丁属名: Newcastle       disease virus

核盘菌GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

芽胞杆菌GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

溶淀粉类芽孢杆菌OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus amylolyticus

岸边亚硫酸盐杆菌DβH (Dopamine-β-Hydroxylase) ELISA Kit拉丁属名: Sulfitobacter litoralis

樟疫霉MDC/CCL22 (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

深层大洋芽孢杆菌Preptin ELISA Kit拉丁属名: Oceanobacillus profundus
禽病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书SPHK2  鞘氨醇激酶2抗体银线草内酯醇Naphtho[2,3-b]furan-2(4H)-one,4a,5,6,7,8,8ahexahydro- 5-hydroxy-3,5,8a-trimethyl-,(4aR,5R,8aR)- 化学标准品 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.3175

STK3  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3抗体康普瑞汀COMBRETASTATIN A-4中药标准品  分 子 式: C18H20O5 分 子 量: 316.3484

IKIP  IKK激酶相互作用蛋白抗体新比克白芷内酯7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-[(2- hydroxy-3-methyl-3-butenyl)oxy]-4- methoxy-,(-)- 对照药材 分 子 式: C17H16O6 分 子 量: 316.30534

AMACR/P504S  α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体10-硝基喜树碱RUBITECAN化学标准品 分 子 式: C20H15N3O6 分 子 量: 393.35

CASC3/MLN51  易感候选基因3抗体去氢毛钩藤碱methyl (3beta,16E)-16-(methoxymethylidene)coryn-18-en-17-oate中药标准品  分 子 式: C22H26N2O3 分 子 量: 366.45344

phospho-IKKi/IKKe(Thr500)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体PBST(1 pH7.4)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TIAF1  TGFB1诱导抗凋亡因子1抗体泽渥萜A'-Neogammacerane-6,22-diol,(6a)-化学标准品 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268