上海联祖生物科技有限公司
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猫细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3607
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-15
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3607
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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英文名称

货号

猫细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Feline Parvovirus(FPV)

LZR3607

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

马克斯克鲁维酵母MS (Melatonin Sulfate) ELISA Kit规格: 冻干物

鞘氨盒菌属CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Sphingopyxis  wooponensis

产气肠杆菌TNKS1 (Tankyrase 1) ELISA Kit拉丁属名: Enterobacter  aerogenes

假单胞菌属PDGFB (Platelet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas prosekii

马阔里类芽孢杆菌HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit拉丁属名: Paenisporosarcina macmurdoensis

球孢白僵菌sTNF-1 (Soluble Tumor Necrosis Factor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

枯草芽孢杆菌MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  subtilis

球孢链霉菌CCR1 (CC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces globisporus

平菇IGFBP-2 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

玫烟色棒束孢SAP25 (Synaptosome Associated Protein 25) ELISA Kit拉丁属名: Isaria fumosorosea

污黑腐皮壳ABCA1(ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit拉丁属名: Valsa sordida Nitschke

热带假丝酵母Ntn4 (Netrin 4) ELISA Kit拉丁属名: Candida tropicalis

大西洋鲁杰氏菌EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Ruegeria atlantica

滑菇BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

缺陷短波单胞菌C3bR (Complement Fragment 3b Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Brevundimonas diminuta
猫细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书SSX5  滑膜X断点蛋白5抗体洋地黄毒苷Digitoxin中药标准品  分 子 式: C41H64O13 分 子 量: 764.93906

STEAP4/TNFAIP9  α诱导蛋白9/六跨膜上皮抗原4抗体3,4,5-三甲氧基苯酚3,4,5-Trimethoxyphenol对照药材 分 子 式: C9H12O4 分 子 量: 184.18918

STK31  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶31抗体黄芩苷甲酯Baicalin methyl ester化学标准品 分 子 式: C22H20O11 分 子 量: 460.388

UTP14A/SDCCAG16  抗原16抗体盐酸益母草碱Leonurine hydrochloride中药标准品  分 子 式: C14H21N3O5 分 子 量: 311.33364

XAGE2  /睾丸抗原12家族2抗体细菌冻存液标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ITIH1  衍生透明质酸相关蛋白抗体丹酚酸A(R)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-(((E)-3-(2-((E)-3,4-dihydroxystyryl)-3,4-dihydroxyphenyl)acryloyl)oxy)propanoic acid中药标准品  分 子 式: C26H22O10 分 子 量: 494.44688

GBP5/Guanylate binding protein 5  鸟嘌呤核苷酸结合蛋白5抗体Earle's平衡盐粉剂(1×EBSS,含钙镁糖)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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