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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3584
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-07-10
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3584 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
马病毒探针法荧光定量PCR试剂盒供应商 | Equine Rhinitis Virus | LZR3584 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
pDC316GM (Gastric Mucin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
云芝MT1 (Metallothionein 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
灰树花孔菌FLNC (Filamin C, Gamma) ELISA Kit拉丁属名: Grifola frondosa
土壤薄层菌ADCY1 (Adenylate Cyclase 1, Brain) ELISA Kit拉丁属名: Hymenobacter soli
总状毛霉LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁属名: Mucor racemosus
Cerrena unicolorPARC/CCL18 (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
薄层菌属Anti-CIIAb (Anti-Type II Collagen Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Hymenobacter metalli
白僵菌P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit用途: 害虫生物防治
旋丝毛壳P-CK (Pan-Cytokeratin) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium bostrychodes
黄白生丛赤壳IL-2Rβ (Interleukin 2 Receptor Beta) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
苏云金芽孢杆菌MT2 (Metallothionein 2) ELISA Kit 用途: 害虫生物防治
尼泊尔正青霉CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium nepalense
嘴突凸脐蠕孢CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit用途: 研究
枯草芽孢杆菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
塔宾曲霉MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus tubingensis
马病毒探针法荧光定量PCR试剂盒供应商UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活酶E1抗体乙酰基二氢美味草素AAcetyldihydromicromelin A中药标准品 分 子 式: C17H16O7 分 子 量: 332.30474
GAS2L1 生长停滞特异性蛋白2家族1抗体氯化血根碱Sanguinarine化学标准品 分 子 式: C20H14NO4+.Cl- 分 子 量: 367.78246
GAS2L3 生长停滞特异性蛋白2家族3抗体香紫苏内酯(3ar)-(+)-sclareolide中药标准品 分 子 式: C16H26O2 分 子 量: 250.38
GilZ/TilZ 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白抗体D-纤维二糖BETA-D-GLUCOPYRANOSYL(1-4)-D-GLUCOPYRANOSE碳水化合物 分 子 式: C12H22O11 分 子 量: 342.3
MIER2 中胚层诱导早期反应蛋白2抗体多根乌头碱Aconitane-1,8,14-triol,20-ethyl-16-methoxy-4-methyl-, (1a,14a,16b)-化学标准品 分 子 式: C22H35NO4 分 子 量: 377.5176
IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein 分化相关基因2蛋白/立即早期反应蛋白抗体SN2310Butanedioic acid,
(4S)-4,11-diethyl-3,4,12,14-tetrahydro-4-hydroxy-3,14-dioxo-1H-pyrano
[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinolin-9-yl
(2R)-3,4-dihydro-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R,8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]
-2H-1-benzopyran-6-yl ester化学标准品 分 子 式: C55H72N2O9 分 子 量: 905.168180000001
IL-4I1 白细胞介素4诱导蛋白1抗体邻苯二甲酸二异癸酯Bis(8-methylnonyl) phthalate化学标准品 分 子 式: C28H46O4 分 子 量: 446.66244