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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3601
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-15
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3601 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
猫杯状病毒前病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | Feline Calicivirus(FCV) | LZR3601 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
枯草芽孢杆菌FOXO2 (Forkhead Box Protein O2) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
黏着玫瑰变色菌NES1 (Nesfatin 1) ELISA Kit拉丁属名: Roseovarius mucocus
球孢白僵菌PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A/Pappalysin-1) ELISA Kit用途: 生物防治
球孢白僵菌CALLA (Common Acute Lymphocytic Leukaemia Antigen) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
雅致放射毛霉GLβ (Galactosidase Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Actinomucor elegans
大肠埃希菌CKLFSF4 (Chemokine Like Factor Superfamily 4) ELISA Kit拉丁属名: coli
铜绿假单胞菌PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas aeruginosa
Enterobacter cowanii Inoue et al. NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
克鲁弗酵母EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces kluyveri
热带假丝酵母FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit 用途: 饲料酵母,蛋白质含量较高。
蜡状芽孢杆菌MPIF-1/CCL23 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
短密青霉LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit拉丁属名: Penicillum brevicompatum
黄曲霉IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus flavus
香气红冬孢锁掷孢酵母NPHN (Nephrin) ELISA Kit拉丁属名: Rhodosporidiobolus odoratus
谷氨酸棒杆菌Ⅰ型FETUA (Fetuin A) ELISA Kit拉丁属名: Corynebacterium glutamicum
猫杯状病毒前病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 FOXN1 叉头蛋白N1抗体二氢木蝴蝶素A Dihydrooroxylin化学标准品 分 子 式: C16H14O5 分 子 量: 286.27936
Pol II/RNA polymerase II RNA聚合酶II抗体HEPES-BSA溶液(HACM溶液,含钙镁)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Mkl1/MRTF-A myocardin相关转录因子抗体没食子儿茶素(2S,3R)-2-(3,4,5-Trihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol中药标准品 分 子 式: C15H14O7 分 子 量: 306.26746
Dlx5 同源转录因子DLX5抗体噻嗪二酮苷Xanthiside中药标准品 分 子 式: C17H23NO8S 分 子 量: 401
FXR2 脆性X相关蛋白2抗体雌三醇 3-硫酸酯Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol,3-(hydrogen sulfate), (16a,17b)-化学标准品 分 子 式: C18H24O6S 分 子 量: 368.44456
PLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗体盐酸黄连碱Coptisine chloride中药标准品 分 子 式: C19H14ClNO4 分 子 量: 355.77
EHZF/ZN521 锌指蛋白521抗体藤黄酸gambogic acid中药标准品 分 子 式: C38H44O8 分 子 量: 628.75116