客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

朱红链霉菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces cinnabarinus

烟曲霉PPIL1 (Peptidylprolyl Isomerase/Cyclophilin Like 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

越桔假丝酵母PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁属名: Candida vaccinii

巨孢毛霉FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Mucor gigasporus

两型孢毛霉AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Mucor dimorphoporus Lendner

扣囊复膜孢酵母IDE (Insulin Degrading Enzyme) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomycopsis fibuligera

黑曲霉LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  niger

大肠埃希菌C3b (Complement Fragment 3b) ELISA Kit拉丁属名: coli

枯草芽孢杆菌HBβ (Hemoglobin Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus  subtilis

溜曲霉α2-PI (α2-Plasmin Inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  tamarii

球孢白僵菌ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

金针菇F5ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

鼠李糖乳杆菌CLDN3 (Claudin 3) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  rhamnosus

胶囊青霉GCSFR (Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium capsulatum

深红酵母PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
猪附红细胞体探针法荧光定量PCR试剂盒供应商YY1AP1/HCCA2  相关蛋白2抗体（转录因子YY1结合蛋白1抗体）异去甲蟛蜞菊内脂Isodemethylwedelolacton中药标准品  分 子 式: C15H8O7 分 子 量: 300.21982

ZNF146  锌指蛋白146抗体Seliwanoff试剂标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ZNF23  锌指蛋白23抗体掌叶半夏碱戊Pedatisectine F化学标准品 分 子 式: C9H14N2O4 分 子 量:

ZNF364/BCA2/RNF115  相关基因2抗体（锌指蛋白364）去甲氧基矢车菊黄酮素4H-1-Benzopyran-4-one,5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-6-methoxy-对照药材 分 子 式: C17H14O7 分 子 量:

FAM89B/MMTV-R  病毒受体同源蛋白抗体DL-色氨酸2-Amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid化学标准品 分 子 式: C11H12N2O2 分 子 量: 204.22518

IL-11RA  白介素11受体α/IL-11Rα抗体米托拉酮Mitoflaxone中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

KCNQ-1  钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体三白草酮SAUCHINONE中药标准品  分 子 式: C20H20O6 分 子 量: 356.3692