客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

放射形根瘤菌α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit拉丁属名: Rhizobium  radiobacter

细黄链霉菌CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces microflavus

微小杆菌属ANG II R1-Ab (Angiotensin II Receptor 1 Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Exiguobacterium sp.

Pseudofusicoccum stromaticumGAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

米色掷孢酵母PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁属名: Sporobolomyces oryzicola

酿酒酵母TAF13 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 13) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

瑟氏泰勒虫（两当株）ASK-1 (Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) ELISA Kit拉丁属名: sergenti

淡紫灰链霉菌产褐色变种MIA1 (Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit用途: 分类 研究

藤仓镰孢Neopterin ELISA Kit拉丁属名: Fusarium fujikuroi

FlavihumibacterSEMA3A (Semaphorin 3A) ELISA Kit拉丁属名: Flavihumibacter  petaseus

枯草芽孢杆菌VDR (Vitamin D Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

金针菇SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit 拉丁属名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.

茶拟盘多毛孢LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Pestalotiopsis theae

西唐氏链霉菌DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit用途: 产生代谢产物具有抑菌活性

胡椒枯萎病TE (Telomerase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
里氏埃里希氏体探针法荧光定量PCR试剂盒供应商CDH11/OB-Cadherin  钙粘附蛋白-11抗体苦瓜素 I3β,7β,23-Trihydroxycucurbita-5,24-dien-19-al化学标准品 分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972

Lin-28B  RNA结合蛋白LIN28B抗体杨梅醇Tricyclo[12.3.1.12,6]nonadeca-1(18),2,4,6(19),14,16-hexaene-3,9,15-triol,16,17-dimethoxy-, (9R)-对照药材 分 子 式: C21H26O5 分 子 量: 358.42814

HSP1/Protamine P1  精子鱼精蛋白P1抗体二萜酸甲酯Clerodermic acid methyl ester对照药材 分 子 式: C21H30O4 分 子 量: 346.4605

EGR3  早期生长反应蛋白3抗体茯苓酸Pachymic acid中药标准品  分 子 式: C33H52O5 分 子 量: 528.76298

SOX10  转录因子SOX10抗体蔷薇酸,'野鸦椿酸Urs-12-en-28-oic acid,2,3,19-trihydroxy-, (2a,3a)-对照药材 分 子 式: C30H48O5 分 子 量: 488.69912

PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase  细胞膜钙ATP酶4抗体甘草酸单钾盐a-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,20b)-20-carboxy-11-oxo-30-norolean-12-en-3-yl 2-O-b-D-glucopyranuronosyl-, potassiumsalt (1:1), (3b)-中药标准品  分 子 式: C42H61O16-.K+ 分 子 量: 861.022440000001

phospho-ER-beta(ser105)  磷酸化雌激素受体β抗体乙烯硫脲Imidazolidine-2-thione化学标准品 分 子 式: C3H6N2S 分 子 量: 102.15814