上海联祖生物科技有限公司
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迟钝爱德华菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3527
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-07-10
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3527
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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英文名称

货号

迟钝爱德华菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Edwardsiella tarda

LZR3527

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

尖镰孢MT (Melatonin) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium oxysporum Schlechtendal

阪崎克罗诺杆菌PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 拉丁属名: Cronobacter sakazakii

金耳ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 拉丁属名: Tremella aurantialba Bandoni

解葡聚糖类芽胞杆菌TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus glucanolyticus

美澳型核果褐腐病菌MMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

单增李斯特氏菌GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit拉丁属名: Listeria  monocytogenes

路德类酵母EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

植物乳杆菌ACA-IgA (Anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus  plantarum

放射形根瘤菌SELP (P-Selectin) ELISA Kit 拉丁属名: Rhizobium radiobacter

香菇FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

橙黄硬皮马勃PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

黑木耳FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit用途: 试验栽培

多主葡萄壳菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

米曲霉APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  oryzae

昆明灵芝D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 用途: 食药用
迟钝爱德华菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CHCHD2  NS2反式调节蛋白/衰老相关的基因10蛋白抗体妥帕可卡因8-Azabicyclo[3.2.1]octan-3-ol,8-methyl-, 3-benzoate, (3-exo)-化学标准品 分 子 式: C15H19NO2 分 子 量:

CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激酶β抗体瑞枯灵Reticuline中药标准品  分 子 式: C19H23NO4 分 子 量: 329.39022

CHORDC1  含半胱氨酸和组氨酸丰富域蛋白1抗体毛兰素Phenol中药标准品  分 子 式: C18H22O5 分 子 量: 318.36

HIV2 gp36  人类病毒2型抗体(病毒)TEN缓冲液(1×,pH7.2)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-CDK5(Tyr15)  磷酸化周期素依赖性激酶5抗体球花苦苷b-D-Glucopyranoside,(1aS,1bS,2S,*R,6S,6aS)-1a,1b,2,*,6,6a-hexahydro-6-hydroxy-1a-[[[(2E)-1-oxo-3-phenyl-2-propen-1-yl]oxy]methyl]oxireno[4,5]cyclopenta[1,2-c]pyran-2-yl对照药材 分 子 式: C23H26O11 分 子 量: 478.44594

MRC2/CD280  巨噬细胞甘露糖受体2抗体银杏酸C15:0Benzoic acid,2-hydroxy-6-pentadecyl-化学标准品 分 子 式: C22H36O3 分 子 量: 348.51944

Tetranectin/CLEC3B/TNA  四连接素TN抗体环磷酸腺苷Adenosine Cyclophosphate化学标准品 分 子 式: C10H12N5O6P 分 子 量: 329.21

 


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