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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3547
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-05-16
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3547 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
阪崎肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Enterobacter sakazaki | LZR3547 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
长枝木霉 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
枯草芽孢杆菌CD23/FcεRII (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
毛栓孔菌PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁属名: Trametes hirsuta
蓝微褐链霉菌RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces cyaneofuscatus
紫红链霉菌Ext-N (N-Terminal Extein) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces violaceoruber
节杆菌cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I) ELISA Kit 拉丁属名: Arthrobacter livingstonensis
猴头菌FLNα (Filamin A, Alpha) ELISA Kit用途: 食药用菌
尖顶盐单胞菌NT (Neurotensin) ELISA Kit拉丁属名: Halomonas arcis
嗜果黑星菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
粪肠球菌PLB (Phospholipase B) ELISA Kit拉丁属名: Enterococcus faecalis
努比卤地无氧芽孢杆菌GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁属名: Anoxybacillus rupiensis
草酸青霉GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium oxalicum
卡伍尔链霉菌HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces cavourensis Skarbek and Brady
拟胞囊菌OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁属名: Kibdelosporangium sp.
多主葡萄壳菌CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
阪崎肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书RRBP1 核糖体结合蛋白1抗体强力霉素doxycycline中药标准品 分 子 式: C22H24N2O8 分 子 量: 444.44
S100A7/Psoriasin S100钙结合蛋白A7抗体枸橼酸钠抗凝剂(3.2%,无菌)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
RBBP6 视网膜母细胞瘤结合蛋白6抗体大果桉醛 NMacrocarpal N对照药材 分 子 式: 分 子 量:
S100PBP/S100P binding protein S100P结合蛋白抗体四乙酸堪非醇酯2-(4-Acetoxyphenyl)-4-oxo-4H-chromene-3,5,7-triyl triacetate对照药材 分 子 式: C23H18O10 分 子 量: 454.38302
SAMD14 SAMD14抗体单葡萄糖醛酸甘草次酸b-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,20b)-20-carboxy-11-oxo-30-norolean-12-en-3-yl化学标准品 分 子 式: C36H54O10 分 子 量: 646.80796
CDMP1/GDF5 软骨衍生形态发生蛋白1抗体没食子酸辛酯Octyl gallate中药标准品 分 子 式: C15H22O5 分 子 量: 282.33218
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 磷酸化RNA聚合酶II CTD抗体重楼皂苷E化学标准品 分 子 式: C51H82O20 分 子 量: 1015.18478