客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

酿酒酵母GLUT2 (Glucose Transporter 2)ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

柴油食烷菌AChE (Acetylcholinesterase) ELISA Kit拉丁属名: Alcanivorax dieselolei

蕈状芽孢杆菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

茫崖诺卡氏菌ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit 拉丁属名: Nocardia mangyaensis

泡盛曲霉EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus awamori Nakazawa

假芽胞杆菌属ELOA (Elongin A) ELISA Kit 拉丁属名: Fictibacillus sp.

广岛链霉菌EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces hiroshimensis

天目山类芽孢杆菌EG-VEGF (Endocrine Gland Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus tianmuensis

边缘假单胞菌ALB (Albumin) ELISA Kit用途: 分类、研究，具有处理养殖废水潜力。

聚生壳菌ERN1 (Endoplasmic Reticulum To Nucleus Signalling 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

汉逊德巴利酵母 ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁属名: Debaryomyces hansenii

粉红单端孢霉EL (Endothelial lipase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

乳酸乳球菌NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit拉丁属名: Lactococcus  lactis

原玻璃蝇节杆菌ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit拉丁属名: Arthrobacter protophormiae

噬尼古丁节杆菌EGF (Epidermal Growth Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Arthrobacter  nicotinovorans
破梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书GRM2/GLUR2  促代谢型谷氨酸受体2抗体三七皂苷Ft1中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

CD133  造血干细胞抗原CD133抗体DL-亮氨酸DL-Leucine化学标准品 分 子 式: C6H13NO2 分 子 量: 131.17292

Mucin 4/Muc4  粘蛋白-4抗体大果桉醛BMacrocarpal B中药标准品  分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136

BKCA alpha  钙激活钾通道蛋白α抗体β，β’-二甲基丙烯酰阿卡宁β, β-dimethylacrylalkannin化学标准品 分 子 式: C21H22O6 分 子 量: 370.40

HSPB2  热休克蛋白B2抗体飞燕草色素1-Benzopyrylium,3,5,7-trihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-, chloride (1:1)化学标准品 分 子 式: C15H11O7.Cl 分 子 量:

phospho-CD19(Ser227)  磷酸化CD19抗体短叶老鹤草素 A2-Butenoic acid,2-methyl-,(3S,3aR,4S,4aR,7aR,8R,9aR)-2,3,3a,4,4a,5,7a,8,9,9a-decahydro-3,4a,8-trimethyl-2,5-dioxoazuleno[6,5-b]furan-4-ylester, (2Z)-对照药材 分 子 式: C20H26O5 分 子 量: 346.41744

CD8  CD8抗体月桂烯（香叶烯）7-Methyl-3-methyleneocta-1,6-diene中药标准品  分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.23404