PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品：

酒色青霉AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium vinaceum

加纳链霉菌FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

蜡样芽孢杆菌FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus cereus

球毛壳FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium globosum

印度芽孢杆菌bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus indicus

泛菌属BAFFR (B-Cell Activation Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Pantoea  sp.

短小芽孢杆菌BCL10 (B-Cell  Leukemia/Lymphoma 10) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus pumilus

嗜盐梗孢酵母BCL3 (B-Cell  Leukemia/Lymphoma 3) ELISA Kit拉丁属名: Sterigmatomyces halophilus

枝孢属BCL-2 (B-Cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁属名: Cladosporium  sp.

毛簇木霉BAK1 (BCL2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit 拉丁属名: T.velutinum

植物乳杆菌植物亚种BAX (BCL-2 Associated X Protein) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

首尔链霉菌BMF (BCL-2 Modifying Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces seoulensis

束红球菌BAD (BCL-2 Associated Death Promoter) ELISA Kit拉丁属名: Rhodococcus fascians

美澳型核果褐腐病菌BTC (Betacellulin) ELISA Kit 拉丁属名: Monilinia fructicola

黄色篮状菌BACE1 (Beta Site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit拉丁属名: Talaromyces flavus
中华枝睾吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒说明书phospho-SYN1(Ser603)   磷酸化神经突触素1抗体松脂酚，松脂醇，松脂素Phenol,4,4'-[(1S,3aR,4S,6aR)-tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1,4-diyl]bis[2-methoxy-对照药材 分 子 式: C20H22O6 分 子 量: 358.38508

phospho-SYN1(Ser62+Ser67)  磷酸化神经突触素1抗体19-表阿马碱Oxayohimban-16-carboxylicacid, 16,17-didehydro-19-methyl-, methyl ester, (19b)-化学标准品 分 子 式: C21H24N2O3 分 子 量: 352.42686

AD7c-NTP  神经丝蛋白抗体次皂甙元CP4Presapogenin CP4化学标准品 分 子 式: C46H74O15 分 子 量: 866

ADAMTS2  整合素样金属蛋白酶与凝血酶2型抗体Ringer's液(两栖动物专用)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

AD7C-NTP(human)  神经丝蛋白抗体（人）(R型)人参皂苷Rg2中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

AD7C-NTP  神经丝蛋白抗体硝酸银水溶液(5%)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

5HTR3B/5HT3B receptor  5-羟色胺受体3B抗体胶霉毒素10H-3,10a-Epidithiopyrazino[1,2-a]indole-1,4-dione,2,3,*,6-tetrahydro-6-hydroxy-3-(hydroxymethyl)-2-methyl-, (3R,*S,6S,10aR)-化学标准品 分 子 式: C13H14N2O4S2 分 子 量: 326.39126