客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

坚强芽孢杆菌SVCAM-1 (Soluble Vascuolar Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus firmus

根瘤菌FLT1/VEGFR1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

苏云金芽孢杆菌LDL-C (low density lipoprotein cholesterol) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus thuringiensis Berliner

枯草芽孢杆菌SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus subtilis

三叶草根瘤菌SST (Somatostatin) ELISA Kit用途: 与三叶草共生固氮

紫孢侧耳（美味侧耳）SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 用途: 食用

枯草芽孢杆菌SCFR (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

pQE31SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit拉丁属名: 宿主：DH5α，BL21

刺毛壳SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit用途: 水解纤维素(hydrolyzes cellulose)  水解凝胶(hydrolyzes gelatin)  水解淀粉(hydrolyzes starch )

小鼠小短杆菌SREBP (Sterol Regulatory Element Binding Proteins) ELISA Kit拉丁属名: Brachybacterium  muris

巴斯德毕赤酵母SDF-1 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit用途: 高效表达、分泌、 葡聚糖酶

酿酒酵母SDF-1β (Stromal Cell Derived Factor 1β) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

大肠埃希菌SDF2 (Stromal Cell Derived Factor 2) ELISA Kit 拉丁属名: coli

德尔布有孢酵母SDF2L1 (Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Torulaspora delbrueckii

乳杆菌属SDF4 (Stromal Cell Derived Factor 4) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  sp.
库蠓通用探针法荧光定量PCR试剂盒 KMT8/Riz1/Riz2  转录因子GATA3结合蛋白G3B抗体杨梅苷3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one中药标准品  分 子 式: C21H20O12 分 子 量: 464.3763

GLIPR1  脑机制相关蛋白1抗体甲基正壬酮2-Undecanone中药标准品  分 子 式: C11H22O 分 子 量: 170.29

RING1  环指蛋白1抗体甲酸水溶液(10%)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PIG3/TP53I3  p53诱导蛋白3抗体阿魏酸4-Hydroxy-3-methoxycinnamic acid中药标准品  分 子 式: C10H10O4 分 子 量: 194.184

PRMT4  组蛋白精氨酸甲基转移酶CARM1抗体澳洲茄边碱b-D-Glucopyranoside, (3b,22a,25R)-spirosol-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)]-中药标准品  分 子 式: C45H73NO15 分 子 量:

TP53I13  蛋白p53诱导蛋白13(抑制基因)吉马酮(3E,7E)-3,7-Dimethyl-10-(propan-2-ylidene)cyclodeca-3,7-dienone中药标准品  分 子 式: C15H22O 分 子 量: 218.33458

p53 DINP1  p53诱导核蛋白1抗体异橙皮内酯2H-1-Benzopyran-2-one,7-methoxy-8-(3-methyl-2-oxobutyl)-对照药材 分 子 式: C15H16O4 分 子 量: 260.28514