客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

大丽轮枝霉PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 拉丁属名: Verticillium dahliae Kleb

鲁氏接合酵母PKB (Protein Kinase B) ELISA Kit拉丁属名: Zygosaccharomyces  rouxii

枯草芽孢杆菌PKCB1 (Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

白鲍鱼菇PKCD (Protein Kinase C Delta) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

米曲霉PKCE (Protein Kinase C Epsilon) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus oryzae

稀奇链霉菌PKCG (Protein Kinase C Gamma) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces paradoxus

白色假丝酵母*PKCI (Protein Kinase C Iota) ELISA Kit拉丁属名: Candida albicans (Robin) Berkhout

小刺青霉PKCq (Protein Kinase C Theta) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium spinulosum

薄层菌PKCZ (Protein Kinase C Zeta) ELISA Kit 拉丁属名: Hymenobacter sp.

细疣篮状菌PKC (Protein Kinase C)ELISA Kit拉丁属名: Talaromyces verruculosus

亮白曲霉PKD1 (Protein Kinase D1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

金龟子绿僵菌PKD2 (Protein Kinase D2) ELISA Kit 拉丁属名: Metarhizium anisopliae

蜡状芽孢杆菌PKIA (Protein Kinase Inhibitor Alpha) ELISA Kit 用途: 害虫生物防治

折叠马赛菌PKIB (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Massilia plicata

棘孢木霉PKIG (Protein Kinase Inhibitor Gamma) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma  asperellum
贝氏隐孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒说明书RERG  Ras相关雌激素调节生长抑制蛋白芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷Vicenin III化学标准品 分 子 式: C26H28O14 分 子 量: 564.49212

RHOBTB1  Rho相关结构域BTB蛋白质1抗体Β-香树脂酮醇Olean-12-en-11-one, 3-hydroxy-, (3b)-对照药材 分 子 式: C30H48O2 分 子 量: 440.70092

RIL  基因PDLIM4抗体细胞核蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

RIN1  RAS抑制蛋白1抗体短叶松素4H-1-Benzopyran-4-one,2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-2-phenyl-, (2R,3R)-对照药材 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278

RND3/RHOE  Rho家族GTP酶3抗体灵芝酸C6Ganoderic acid C6化学标准品 分 子 式:  分 子 量:

RSRC2  蛋白抗体菜油甾醇Ergost-5-en-3-ol, (3尾,24R)-中药标准品  分 子 式: C28H48O 分 子 量: 400.68012

PARG1/Rho GTPase activating protein 29  Rho GTP酶激活蛋白29抗体丹参新酮3,4-Phenanthrenedione,5,6,7,8-tetrahydro-8,8-dimethyl-2-(1-methylethyl)-中药标准品  分 子 式: C19H22O2 分 子 量: 282.37678