上海联祖生物科技有限公司
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牛痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3481
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-05-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3481
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

牛痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒

Cowpox Virus(CPV)

LZR3481

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

朱黄篮状菌OxLDL (Oxidized Lowdensity Lipoprotein) ELISA Kit 拉丁属名: Talaromyces minioluteus

Paenibacillus durusMAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus durus

解脂假丝酵母PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit拉丁属名: Candida  lipolytica

加德纳菌Smad3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit拉丁属名: Gardnerella  vaginalis

长蠕孢PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

褐囊蜜环菌PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

野土地杆菌PTHRP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit拉丁属名: Pedobacter  agri

酿酒酵母PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

不产色链霉菌不产色亚种PTD (Pentosidine) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces achromogenes subsp. achromogenes

酿酒酵母PP (Pepsin) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

噬果胶黄杆菌PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁属名: Flavobacterium  pectinovorum

地衣芽孢杆菌PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit  拉丁属名: Bacillus  licheniformis

康宁木霉Hp-IgM (Helicobacter Pylori IgM) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma koningii

相思根瘤菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

膨端青霉PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium inflatum
牛痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 CRABP2  细胞维甲酸结合蛋白2抗体13-羟基-8,11,13-罗汉松科三烯-18-酸(1S,4aS)-7-Hydroxy-1,4a-dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylic acid对照药材 分 子 式: C17H22O3 分 子 量: 274.35478

CST7/Cystatin F  半胱氨酸蛋白酶抑制剂7抗体柚皮素(S)-5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chroman-4-one中药标准品  分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278

NBL1/DAND1  神经母细胞瘤抑瘤蛋白1抗体丹酚酸CSalvianolicacid C中药标准品  分 子 式: C26H20O10 分 子 量: 492.431

DLL4/Delta 4  Notch信号通路Delta样配体4抗体山奈素ARTEMISININ中药标准品  分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288

DPP2  溶酶体丝氨酸蛋白酶DPP2抗体京尼平1,4a,5,7a-Tetrahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-cyclopenta(c)pyran-4-carboxylic acid methyl ester中药标准品  分 子 式: C11H14O5 分 子 量: 226.22586

FSTL1/FRP  卵泡相关蛋白1维生素UVitamin U中药标准品  分 子 式: C5H11NO2S.CH5S+.Cl- 分 子 量: 233.77974

HPGD/PGDH1/Prostaglandin dehydrogenase 1  素脱氢酶1抗体2,3-脱氢维酮5,7-Dihydroxy-3-(2,4-dihydroxyphenyl)-8-(3-methyl-2-butenyl)-4H-1-benzopyran-4-one对照药材 分 子 式: C20H18O6 分 子 量: 354.35332

 


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