上海联祖生物科技有限公司
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嗜人锥蝇探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3463
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-11
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3463
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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英文名称

货号

嗜人锥蝇探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Cochliomyia hominivorax

LZR3463

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

冬虫夏草GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁属名: Ophiocordyceps  sinensis

酿酒酵母GITR (Glucocorticoid Induced Tumor Necrosis Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

哈茨木霉GR (Glucocorticoid Receptor) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

蓝绿小四孢菌GRα (Glucocorticoid Receptor α) ELISA Kit 拉丁属名: Microtetraspora cyneoviridis

酿酒酵母GRβ (Glucocorticoid Receptor β) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

枯草芽孢杆菌GC (Glucagon) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

短双歧杆菌GCK (Glucokinase) ELISA Kit 拉丁属名: Bifidobacterium  breve

西班牙糖丝菌gp130 (Glucoprotein 130) ELISA Kit拉丁属名: Saccharothrix espanaensis

匍枝根霉原变种G6PD (Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁属名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer

桂花地霉GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit 拉丁属名: Geotrichum fragrans

竹喙球菌GLUT4 (Glucose Transporter 4)ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

黄柄曲霉GUSb (Glucuronidase, Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus flavipes (Bainier et Sartory) Thom et Church

鲑色锁掷酵母GCLM (Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit 拉丁属名: Sporidiobolus  salmonicolor

DeinococcusGAD2 (Glutamate Decarboxylase 2, Acid) ELISA Kit 拉丁属名: Deinococcus sp.

藤黄孢链霉菌GDH (Glutamate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces luteosporeus
嗜人锥蝇探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CD73/NT5  CD73抗体甲氧呋豆素visnagin对照药材 分 子 式: C13H10O4 分 子 量: 230.2161

MAL/MPV17  T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体南五味子酸甲酯(3R,3aR,6S,7S,9aS,9bS)-3-[(1R,4Z)-5-carboxy-1-methylhex-4-en-1-yl]-2,3,3a,4,6,7,8,9,9a,9b-decahydro-3a,6,9b-trimethyl-7-(1-methylethenyl)-1H-benz[e]indene-6-propanoic acid methyl ester化学标准品 分 子 式: C31H48O4 分 子 量: 484.71042

CXC-R2  CXCR2/CD182Tris-EDTA缓冲液(1×TE,pH8.0)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

HE4  附睾分泌蛋白4抗体D(十)-无水葡萄糖(2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-Pentahydroxyhexanal碳水化合物  分 子 式: C6H12O6 分 子 量: 180.15588

nonstructural protein 1/NS1  A型病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1)大果桉醛 JMacrocarpal-J对照药材 分 子 式: C28H42O7 分 子 量: 490.62888

Factor VII  凝血因子7抗体伪金丝桃素Pseudohypericin中药标准品  分 子 式: C30H16O9 分 子 量: 520.44

phospho-ITGB4(Tyr1530)  磷酸化整合素β4抗体蔓荆子黄素Casticin中药标准品  分 子 式: C19H18O8 分 子 量: 374.34142

 


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