客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

巴氏醋杆菌CLU (Clusterin) ELISA Kit拉丁属名: Acetobacter  pasteurianus

蜡状芽孢杆菌FⅡ(Coagulation Factor Ⅱ)ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus

委内瑞拉链霉菌FⅢ (Coagulation Factor Ⅲ) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces venezuelae Ehrlich et al.

丽齿菌属FⅩ (Coagulation Factor Ⅹ) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

盐古杆菌FⅩⅢ (Coagulation Factor ⅩⅢ) ELISA Kit拉丁属名: Halobacterium sp.

分枝节杆菌FⅫ (Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit拉丁属名: Arthrobacter ramosus

匍枝根霉(黑根霉)FIX (Coagulation Factor IX) ELISA Kit 拉丁属名: Rhizopus stolonifer

肠沙门氏菌肠亚种FV (Coagulation Factor V) ELISA Kit 拉丁属名: Salmonella  enterica subsp. enterica

戊糖片球菌CFL1 (Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit拉丁属名: Pediococcus  pentosaceus

扣囊复膜孢酵母CFL2 (Cofilin 2, Muscle) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomycopsis fibuligera

红曲霉COL1 (Collagen Type Ⅰ) ELISA Kit 用途: 用于 红曲米

尖针芽孢酵母COL2 (Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit拉丁属名: Aciculoconidium aculeatum

链霉菌属COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces  sp.

氧化微杆菌COL4 (Collagen Type Ⅳ) ELISA Kit 拉丁属名: Microbacterium oxydans

腊状芽胞杆菌COL1α2 (Collagen Type I Alpha 2) ELISA Kit  用途: 产谷氨酸
诺氏梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CRLF2  胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体腺嘌呤1H-Purin-6-amine中药标准品  分 子 式: C5H5N5 分 子 量: 135.1267

ASB10  含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体牡丹皮苷CMudanpioside C中药标准品  分 子 式: C30H32O13 分 子 量: 600.56728

MARK4  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK4抗体异欧前胡素isoimperatorin中药标准品  分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.28

phospho-MARK4(Ser423)  磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK4抗体异-罗汉果皂苷 Visomogroside V中药标准品  分 子 式: C60H102O29 分 子 量: 1287.43448

phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39)  磷酸化转录因子3抗体贝母素乙Peiminine中药标准品  分 子 式: C27H43NO3 分 子 量: 429.64

IgHV/IgH  免疫球蛋白重链可变区抗体二氢异丹参酮IDihydrotanshinone化学标准品 分 子 式: C18H14O3 分 子 量: 278.30196

Mammaglobin A  乳腺珠蛋白1抗体(-)-紫堇明(-)-Corlumine对照药材 分 子 式: C21H21NO6 分 子 量: 383.39454