上海联祖生物科技有限公司
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鸡胚致死孤儿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3423
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-05-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3423
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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货号

鸡胚致死孤儿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)

LZR3423

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

灰树花TAF4 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 4) ELISA Kit  用途: 用于科研教学。

根瘤菌MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

澳大利亚糖丝菌TXLNa (Taxilin Alpha) ELISA Kit  拉丁属名: Saccharothrix australiensis

根瘤菌TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit  用途: 与紫穗槐共生固氮

酿酒酵母TEK (Tyrosine Kinase, Endothelial) ELISA Kit  拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

酿酒酵母TE (telomerase) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

维罗纳假单胞菌TNC (Tenascin C) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

平脐蠕孢菌TNX (Tenascin X) ELISA Kit 用途: 研究

金黄色葡萄球菌TDG1 (Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1) ELISA Kit  拉丁属名: Staphylococcus  aureus

玻利维亚盐单胞菌TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit拉丁属名: Halomonas boliviensis

草生链霉菌TIEG1 (TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces pratensis

金顶侧耳、榆黄磨、金顶磨TBP2 (Thioredoxin Binding Protein 2) ELISA Kit  拉丁属名: Pleurotus citrinopileatus Sing.

葡萄座腔菌TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

适宜剑菌Trx (Thioredoxin) ELISA Kit 拉丁属名: Ensifer terangae

鸡枞(鸡菌)TAFI (Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: Termitomyces eurhizus
鸡胚致死孤儿病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书OST-beta  有机溶质转运蛋白OSTβ抗体氯化两面针碱2,3-Dimethoxy-12-methyl-[1,3]dioxolo[4',5':4,5]benzo[1,2-c]phenanthridin-12-ium chloride中药标准品  分 子 式: C21H18NO4+.Cl- 分 子 量: 383.82492

AANAT  芳香胺N-乙酰化转移酶抗体拉莫三嗪6-(2,3-Dichlorophenyl)-1,2,4-triazine-3,5-diamine化学标准品 分 子 式: C9H7N5Cl2 分 子 量: 256.09138

AT2R2  紧张素Ⅱ受体2抗体尖叶云香碱,吴茱萸素2,3-Butanediol,1-[(4,8-dimethoxyfuro[2,3-b]quinolin-7-yl)oxy]-3-methyl-, (2R)-对照药材 分 子 式: C18H21NO6 分 子 量: 347.36244

Influenza A virus (Duck)  鸭病毒抗体牛七碱Aconitane-3,13,14,15-tetrol,8-ethoxy-20-ethyl-1,6,16-trimethoxy-4-(methoxymethyl)-, 3-acetate 14-benzoate,(1a,3a,6a,14a,15a,16b)-化学标准品 分 子 式: C36H51NO11 分 子 量: 673.79024

TNF-alpha  -α抗体(1R)-(-)-桃金娘烯醛(-)-Myrtenal化学标准品 分 子 式: C10H14O 分 子 量: 150.21756

AARS2  丙氨酰tRNA合成酶2抗体1,3,7-三羟基-9H-氧杂蒽-9-酮9H-Xanthen-9-one,1,3,7-trihydroxy-化学标准品 分 子 式: C13H8O5 分 子 量:

TDRD9/HIG1  缺氧诱导蛋白HIG1抗体常春藤皂苷元Hederagenin中药标准品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.7

 


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