客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

卡坦正青霉PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium katangense

摩洛哥芽孢杆菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

热带假丝酵母PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-activated receptor γ) ELISA Kit拉丁属名: Candida tropicalis

发状孢囊游动放线菌PPAR-α (Peroxisome Proliferators-activator Receptors alpha) ELISA Kit拉丁属名: Actinoplanes capillaceus

秦氏蜜环菌PT-IgA (Pertussis virus IgA) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

灰耳担布勒酵母PI Ab-IgG/IgM (phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 拉丁属名: Auriculibuller fuscus

巴氏醋杆菌罗旺亚种PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁属名: Acetobacter  pasteurianus subsp. lovaniensis

伞枝犁头霉P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁属名: Absidia corymbifera

沙漠毕赤酵母pERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁属名: Pichia deserticola

黑曲霉PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit  拉丁属名: Aspergillus  niger

葡萄座腔菌PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

芽孢杆菌属PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit  拉丁属名: Bacillus  sp.

短芽孢杆菌LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus pumilus

仙台链霉菌PLCg1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit  用途: 产生代谢产物具有抑菌活性

阪崎克罗诺杆菌PI3K (Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit拉丁属名: Cronobacter  sakazakii
山羊RT-脑脊髓炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒规格Melamine/OVA(ovalbumin)  三聚氰胺与鸡卵白蛋白偶联物Mg-ATP溶液(10mmol/L,pH7.4)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

chloramphenicol/BSA  氯霉素偶联牛血清白蛋白土贝母苷乙TubeiMoside II中药标准品  分 子 式:  分 子 量:

chloramphenicol/OVA  氯霉素偶联鸡卵白蛋白蛋白银线草醇 DPropanoic acid,2-[(1aR,1bS,2R,4aR,4bS,8aS,9R,9aS,10aR,10bS,10cS,11bS)-9-[(acetyloxy)methyl]-1a,1b,2,3,4a,6,8,8a,9,9a,10,10a,10b,10c,11,11b-hexadecahydro-2-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1b,10b-dimethyl-3,6-dioxocyclopropa[4,5]cyclopropa[4',5']cyclopent[1',2':7,8]acephenanthryleno[10a,10-b]furan-4(1H)-ylidene]-,methyl ester, (2Z)-对照药材 分 子 式: C33H38O9 分 子 量:

Gentamicin/BSA  庆大霉素偶联牛血清白蛋白5,7-二乙酰氧基黄酮4-Oxo-2-phenyl-4H-chromene-5,7-diyl diacetate对照药材 分 子 式: C19H14O6 分 子 量: 338.31086

Gentamicin/OVA  庆大霉素偶联鸡卵白蛋白辛辣内酯ASpiro[furo[2',3':5,6]cyclohepta[1,2-b]pyran-6(2H),6'(1'aH)-[5H]oxireno[4,5]cyclohepta[1,2-b]furan]-2,5'-dione,7-acetyl-2',3,3',3'a,3a,4,4a,6'a,7',7'a,8a,9,10,10a-tetradecahydro-8a-hydroxy-2',9-dimethyl-3-methylene-1'a-[(1E)-3-oxo-1-buten-1-yl]-,(1'aR,2'R,3'aS,3aR,4aR,6R,6'aR,7'aR,8aR,9S,10aR)-中药标准品  分 子 式: C29H34O9 分 子 量:

Tetracycline/BSA  四环素偶联牛血清白蛋白曲克芦丁trihydroxyethylrutin中药标准品  分 子 式: C33H42O19 分 子 量: 742.68

Gentamicin/FITC  荧光素标记庆大霉素漆黄素； 紫铆素7,3,4-Trihydroxyflavanone化学标准品 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278