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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3363
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-05-16
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3363 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Brucella abortus | LZR3363 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
樟疫霉ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
拟康宁木霉ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
拟青霉ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
嗜麦芽寡养单胞菌ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas maltophilia
盖氏海杆状菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit拉丁属名: Marinobacter guineae
帚状曲霉ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus penicillioides
大肠埃希菌ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit拉丁属名: coli
粘孢白僵菌ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit拉丁属名: Beauveria velata
黄曲霉ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus flavus Link
棒形青霉α-Fodrin IgG/IgA (anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium claviforme
枯草芽孢杆菌ACA-IgA (anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
地衣芽胞杆菌ACA-IgG (anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus licheniformis
三线镰孢ACA-IgM (anti-Cardiolipin Antibody IgM) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium tricinctum
爪哇根霉ACA (anti-Centrol and Centrosome Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Rhizopus javanicus Takada
巨大芽孢杆菌 AADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CXCL16 peptide CXC趋化因子16抗原HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Sema3A (semaphorin 3A) 臂板蛋白3A(多肽)白术内酯IIIAtractylenolide III中药标准品 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.32
Sema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原去乙酰基Ophiopojaponin A中药标准品 分 子 式: 分 子 量:
SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相关蛋白1抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷6'-O-beta-D-Apiofuranosylsweroside化学标准品 分 子 式: 分 子 量:
SGLT1(sodium-glucose cotransporter1) 钠-葡萄糖共转运载体1抗原氟罗沙星Fleroxacin化学标准品 分 子 式: C17H18N3O3F3 分 子 量: 369.33832
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原甲基赤芝萜酮methyl-对照药材 分 子 式: C22H34N4O5S2Cl2 分 子 量: 569.56516
Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体(O139菌型)远志皂苷DOlean-12-en-28-oicacid, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-2,16,23-trihydroxy-,O-D-apio-b-D-furanosyl-(1®3)-O-b-D-xylopyranosyl-(1®4)-O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-a-L-arabinopyranosyl ester, (2b,3b,4b,16a)-中药标准品 分 子 式: C57H92O27 分 子 量: 1209.32418