客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

孢囊杆菌C4a (Complement Component  4a) ELISA Kit拉丁属名: Cystobacter SP.

肠膜明串珠菌C* (Complement Component  *) ELISA Kit拉丁属名: Leuconostoc  mesenteroides

深海芽孢杆菌CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit拉丁属名: Thalassobacillus  sp.

果生链核盘菌CX26 (Connexin 26) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

抗生链霉菌CX31 (Connexin 31) ELISA Kit  拉丁属名: Streptomyces antibioticus

谷氨酸棒杆菌CX37 (Connexin 37) ELISA Kit  拉丁属名: Corynebacterium  glutamicum

节杆菌属CX40 (Connexin 40) ELISA Kit  拉丁属名: Arthrobacter     pascens

黑根须腹菌CX43 (Connexin 43) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

平菇CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit  用途: 食用、药用

螺卷毛壳CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit  拉丁属名: Chaetomium cochliodes

鲜绿青霉CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit  拉丁属名: Penicillium viridicatum

酿酒酵母CORT (Corticosterone) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

米曲霉SIRT1 (NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-1) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  oryzae

酿酒酵母CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

日勾维肠杆菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁属名: Enterobacter gergoviae
伯克氏菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒规格VEGFR2  内皮生长因子受体2Tesetaxel2-Pyridinepropanoic acid, b-[[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]amino]-3-fluoro-a-hydroxy-,(2aS,2bR,3S,4S,6S,8aR,10S,11aS,11bR,13aR)-2a-(acetyloxy)-3-(benzoyloxy)-10-[(dimethylamino)methyl]-2a,2b,3,4,5,6,8a,11a,11b,12,13,13a-dodecahydro-4-hydroxy-7,11b,14,14-tetramethyl-4,8-methano-2H-oxeto[3'',2'':3',4']benzo[1',2':3,4]cyclodeca[1,2-d][1,3]dioxol-6-ylester, (aR,bS)-化学标准品 分 子 式: C46H60N3O13F 分 子 量: 881.979300000001

sVEGFR2  可溶性内皮生长因子受体2肉豆蔻木脂素Myrislignan中药标准品  分 子 式: C29H22N5O4F 分 子 量: 523.51448

VEGFR-3/FLt-4  内皮细胞生长因子受体-3（多肽）Hederacolchiside EOlean-12-en-28-oicacid, 3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®4)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-, O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)-O-b-D-glucopyranosyl-(1®6)-b-D-glucopyranosyl ester, (3b)-中药标准品  分 子 式: C65H106O30 分 子 量:

VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3)  内皮细胞生长因子受体-3抗原3-咖啡酰奎尼酸甲酯3-caffeoylquinic acid methyl ester化学标准品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.335

VWF (Von Willebrand Factor)  假性因子/性因子抗原雷公藤三萜酸 AAbrusgenic-acid对照药材 分 子 式: C30H48O4 分 子 量:

Wnt1  信号通路Wnt1抗原磷酸川芎嗪Lilopristone中药标准品  分 子 式: C29H37NO3 分 子 量: 447.60898

WWOX (WW domain-containing oxidoreductase)  包含氧化还原酶的WW域抗原5-羟基马鞭草苷Hastatoside中药标准品  分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.366