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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3369
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-05-16
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3369 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
绵羊布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | Brucella ovis | LZR3369 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
冻干补体BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit规格: 1ml/200头份
美澳型核果褐腐病菌BMP8B (Bone Morphogenetic Protein 8B) ELISA Kit 拉丁属名: Monilinia fructicola
PaenibacillusBMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A) ELISA Kit拉丁属名: Paenibacillus sp.
大肠埃希菌BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁属名: coli
大肠埃希菌BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁属名: coli
大肠埃希菌CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit拉丁属名: coli
黄硬皮马勃BK (Bradykinin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
柱孢绿僵菌BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁属名: Metarhizium
美丽胡枝子根瘤菌BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁属名: Rhizobium sp.
棉阿舒囊霉BRAK (Breast And Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit 用途: 产核黄素
绿色木霉CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma viride
大肠埃希菌Ca-ATPase (Calcium ATPase) ELISA Kit 拉丁属名: coli
酿酒酵母VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
弓形虫(GTS-2株)E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit拉丁属名: gondii
灰树花-4NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
绵羊布鲁氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 STAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗原凤仙萜四醇苷Fb-D-Glucopyranoside,(1R,2S,4aR,4bR,6'R,6aR,7R,8S,10aR,10bR,12aS)-6'-[(1R)-2-(b-D-glucopyranosyloxy)-1-methylethyl]octadecahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-4a,4b,7,10a-tetramethylspiro[chrysene-2(1H),3'(4'H)-[2H]pyran]-8-yl2-O-b-D-xylopyranosyl- (9CI)化学标准品 分 子 式: C47H80O19 分 子 量:
STAT6(signal transducers and activators of transduction 6) 信号转导和转录激活因子6抗原紫草氰苷Acetonitrile,2-[(4R,5S,6S)-6-(b-D-glucopyranosyloxy)-4,5-dihydroxy-2-cyclohexen-1-ylidene]-,(2Z)-中药标准品 分 子 式: C14H19NO8 分 子 量: 329.30256
SUMO 类泛素蛋白RTA-402Oleana-1,9(11)-dien-28-oicacid, 2-cyano-3,12-dioxo-, methyl ester化学标准品 分 子 式: C32H43NO4 分 子 量: 505.68812
Gamma-Synuclein/SNCG 核突触蛋白-γ抗原2-O-乙酰山椒子烯酮中药标准品 分 子 式: 分 子 量:
phospho-Tau protein (pThr489) peptide 磷酸化微管相关蛋白多肽24-乙酰泽泻醇FAlisol F 24-acetate中药标准品 分 子 式: 分 子 量:
MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相关蛋白2抗原黄柏呈Lanost-7-en-3-one,23,24-dihydroxy-25-methoxy-, (13a,14b,17a,20S,23R,24S)-对照药材 分 子 式: C31H52O4 分 子 量:
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相关蛋白1A抗原氯化钙溶液(1mol/L,无菌)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: