客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

PontibacterHLE (Leukocyte Exastase)ELISA Kit拉丁属名: Pontibacter  yuliense

铜绿假单胞菌LR (Leukoregulin) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas  aeruginosa

酿酒酵母LCA/CD45( Leukocyte Common Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

拟革盖菌LILRB4 (Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B Member 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

球孢白僵菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 用途: 生防

灵芝GARS (Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

高大毛壳EPHA1 (Ephrin Type A Receptor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Chaetomium elatum

佛雷德里克斯堡假单胞菌SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas  frederiksbergensis

大肠埃希菌GP4/CD36 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit拉丁属名: coli

金针菇（毛柄金钱菌、冬菇）NSE (Neuron-Specific Enolase) ELISA Kit拉丁属名: Flammulina velutipes

灵芝PLA2G4D (Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit拉丁属名: Ganoderma  lucidium

大肠埃希氏菌CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli

巨大芽孢杆菌GAL1 (Galectin 1 ) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus megatherium

韩芝GAL12 (Galectin 12 ) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

植物乳杆菌GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus plantarum
马隐秘杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 BOb-1(B-cell oct-binding protein 1)  B细胞特异性转录因子抗原柠檬酸酯CParishin C中药标准品  分 子 式: C32H40O19 分 子 量: 728.6486

PP-2B alpha 1   蛋白磷酸酯酶-2B 催化亚单位（抗原）氨苄青霉素溶液(Ampicillin,100mg/ml)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PR (Progestogerone receptor)  孕激素受体（抗原）黄柏碱Phellodendrine chloride中药标准品  分 子 式: C20H24NO4+ 分 子 量: 342.40886

PS-1(NT)，Presennillin-1(S182)  早老素蛋白-1（抗原）五味子甲素deoxyschizandrin中药标准品  分 子 式: C24H32O6 分 子 量: 416.51

PS-1，Presennillin-1(CT)  早老素蛋白-1（S182）异汉防己甲素isotetrandrine对照药材 分 子 式: C38H42N2O6 分 子 量: 622.74988

BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat)  易感基因1抗原(小鼠 大鼠)氯化失车菊素-3-O-芸香糖苷1-Benzopyrylium,3-[[6-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-,chloride (1:1)化学标准品 分 子 式: C27H31O15.Cl 分 子 量:

BRCA1  易感基因1抗原Trizol(总RNA提取试剂)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: