客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

产色葡萄球菌Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁属名: Staphylococcus chromogenes

变异盐单胞菌Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit 拉丁属名: Halomonas variabilis

裂褶菌PIAS1 (Protein Inhibitor of Activated STAT 1) ELISA Kit用途: 代谢产物

沙壤土杆菌PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ELISA Kit拉丁属名: Ramlibacter sp.

东方伊萨酵母PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁属名: Issatchenkia  orientalis

苏云金芽胞杆菌COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit  拉丁属名: Bacillus  thuringiensis

大肠埃希氏菌SAG (S Antigen) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli

果生链核盘菌THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) ELISA Kit拉丁属名: Monilinia fructigena Honey

NitriliruptorTDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁属名: Nitriliruptor sp.

葡萄座腔菌TBP (TATA Binding Protein) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

马赛菌TAF (TATA Box Binding Protein/TBP-Associated Factors) ELISA Kit拉丁属名: Massilia  niastensis

谷氨酸棒杆菌TAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Corynebacterium  glutamicum

短波单胞菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁属名: Brevundimonas staleyi

草菇TAF13 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 13) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae
无浆体(无形体)通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗剂Bak（多肽）臭矢菜素C9H-Pyrano[2,3-f]-1,4-benzodioxin-9-one,2,3- dihydro-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)- 2-(hydroxymethyl)-5-methoxy-,(2R,3R)-rel- 对照药材 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.3781

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)  一氧化氮合成酶-1（抗原）三十碳六烯-2,3-二醇6,10,14,18,22-Tetracosapentaene-2,3-diol,2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E)- (8CI,9CI)对照药材 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268

NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible  一氧化氮合成酶-2（抗原）艾纳香素4H-1-Benzopyran-4-one,

2-(3,5-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-, (2S)-对照药材 分 子 式: C16H14O6 分 子 量: 302.27876

Batroxobin  蛇毒巴曲酶抗原氯化钠溶液(5mol/L,无菌)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS  一氧化氮合成酶-3（抗原）SSPE缓冲粉剂(20×)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NPY ( Neuropeptide Y)  神经肽 Y（抗原）白桦脂醇Betulin中药标准品  分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.72

NR2B (Glutamate receptor)  谷氨酸受体（抗原）等效-9-羟基-15-氧代-19-异贝壳杉烷酸ent-9-Hydroxy-15-oxo-19-kauranoic acid对照药材 分 子 式:  分 子 量: