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芽孢杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3307
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-05-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3307
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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芽孢杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Bacillus spp.

LZR3307

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

肿囊腐霉UCP-1 (Uncoupling Protein 1, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁属名: Pythium inflatum

立枯丝核菌IL18BP (Interleukin 18 Binding Protein) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

大肠埃希菌MHCG (Major Histocompatibility Complex Class I G) ELISA Kit 拉丁属名: coli

无色壳囊孢TYR (Tyrosinase) ELISA Kit用途: 代谢产物

角磷灰鹅膏菌NFκB2 (Nuclear Factor Kappa B2) ELISA Kit用途: 树木外生菌根

匍匐曲霉FGL1 (Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus repens

隆纹黑蛋巢FBLN2 (Fibulin 2) ELISA Kit拉丁属名: Cyathus striatus

枯草芽孢杆菌PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus subtilis

长枝木霉PDGFB (Platelet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit 拉丁属名: Trichoderma longibrachiatum Rifai

腹膜苍黄球菌ORM2 (Orosomucoid 2) ELISA Kit拉丁属名: Luteococcus peritonei

球孢白僵菌CG (Cryoglobulin) ELISA Kit用途: 昆虫防治研究

多杀性巴氏杆菌*FBLN3 (Fibulin 3) ELISA Kit拉丁属名:  multocida

鲍氏不动杆菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁属名: Acinetobacter baumannii

酿酒酵母PRG4 (Proteoglycan 4) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

类干酪乳杆菌GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus paracasei
芽孢杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Endostatin  内皮抑素/内皮他丁抗原Tris-Tricine阴极缓冲液(5×)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule)  上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子(多肽)毒扁豆碱(3aS,8aR)-1,3a,8-Trimethyl-1,2,3,3a,8,8a-hexahydropyrrolo[2,3-b]indol-5-yl methylcarbamate中药标准品  分 子 式: C15H21N3O2 分 子 量: 275.34614

EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule)  上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗原11-酮基乳香酸11-Keto-beta-boswellic acid中药标准品  分 子 式: C30H46O4 分 子 量: 470.68384

E.coli O6 (Escherichia coli O6)  E.coli O6大肠杆菌菌体蛋白高车前素4',5,7-Trihydroxy-6-methoxyflavone中药标准品  分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288

EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,EPEC)  普通大肠埃希菌菌体蛋白(非致病性)香茶菜乙素Excisanin B化学标准品 分 子 式: C22H32O6 分 子 量: 392.48588

EphA1 R(Ephrin A1 Receptor)  EphA1-R受体抗原硫酸阿托品Atropine sulfate monohydrate其它化学试剂 分 子 式: 2(C17H23NO3).H2SO4.H2O 分 子 量: 694.83

EPOR peptide  红细胞生成素受体抗原AMPPD发光显色试剂盒标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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