客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

青霉FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

金针菇（毛柄金钱菌、冬菇）FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁属名: Flammulina velutipes

大肠埃希菌FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit拉丁属名: coli

牛瘟病毒FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit 拉丁属名: Rinderpest       virus

芽孢杆菌VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus sp.

异常汉逊酵母PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit拉丁属名: Hansenula  anomala

苏云金芽孢杆菌锡卢亚种FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

甲基杆菌属VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit拉丁属名: Methylobacterium  organophilum

根瘤菌TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit用途: 固氮

寄生曲霉PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus  parasiticus

伪假苍黄菌EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudoclavibacter helvolus

多主葡萄壳菌ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

无二酸柠檬酸杆菌ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁属名: Citrobacter amalonaticus

木贼镰孢菌EIPS2 (Estrogen Induced Protein pS2) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium equiseti

香菇EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 拉丁属名: Lentinula edodes
节杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒规格CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita)  钙/钙调素依赖蛋白激酶2b抗原瓜子金皂苷己Polygalasaponin F中药标准品  分 子 式: C53H86O23 分 子 量: 1090.24

CAP1/Park7/DJ-1  Park7/DJ-1/CAP1抗原大果桉醛 HMacrocarpal-H对照药材 分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2)  环化酶相关蛋白CAP-2抗原4-甲基七叶亭4-Methyl-6,7-dihydroxycoumarin化学标准品 分 子 式: C10H8O4 分 子 量: 192.16812

TGF beta 2 Propeptide  转移生长因子–β2前体肽熊果苷Arbutin中药标准品  分 子 式: C12H16O7 分 子 量: 272.25

TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3)  转移生长因子–β3（抗原）相思子碱(S)-2-Amino-3-(1-methyl-1H-indol-3-yl)propanoic acid中药标准品  分 子 式: C12H14N2O2 分 子 量: 218.25176

TGF- Beta R2 peptide  转移生长因子β受体2（多肽抗原）人参皂苷Rb1ginsenoside rb1中药标准品  分 子 式: C54H92O23 分 子 量: 1109.29

Thymosin Alpha-1  胸腺肽 α-1 （胸腺肽-Thymosin alpha-1）异姜花素DIsocoronarin D对照药材 分 子 式: C20H30O3 分 子 量: 318.4504