PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

黑木耳AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

黄杆菌AR (Androgen Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Flavobacterium sp.

枯草芽孢杆菌ARG1 (Arginase I) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

柠檬形克勒克酵母AVPR1A (Arginine Vasopressin Receptor 1A) ELISA Kit拉丁属名: Kloeckera apiculata

球孢白僵菌KLK6 (Kallikrein 6) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

Rhizobium alkalisoliKLK7 (Kallikrein 7) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

产肠毒素大肠埃希氏菌ARHGDIα (Rho GDP Dissociation Inhibitor Alpha ) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia  coli ETEC O78：K80

产朊假丝酵母ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁属名: Candida utilis (Henneberg) Lodder et Kreger-van Rij

苏云金芽孢杆菌ARRβ2 (Arrestin Beta 2) ELISA Kit 用途: 害虫生物防治

假单胞菌MANF (Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit用途: 三天内完全降解50ppm的苯氧基苯甲

粉状毕赤酵母MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁属名: Pichia  farinosa

灰树花G25AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

葡萄牙链霉菌ARSA (Arylsulfatase A) ELISA Kit用途: 代谢产物具有抗菌活性。

谷糠乳杆菌ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus farraginis

秀珍菇ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒规格AEG-1 peptide  AEG-1抗原蔗糖-多聚甲醛溶液(10%)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CD31 (PECAM-1)  血小板内皮细胞黏附分子-1（抗原）1-脱氢-10-姜酮1-dehydro-[10]-gingerdione化学标准品 分 子 式: C21H30O4 分 子 量: 346.4605

ADFP/ADRP/adipophilin   脂肪组织分化相关蛋白抗原盐酸巴马汀Palmatine chloride中药标准品  分 子 式: C21H22ClNO4 分 子 量: 387.86

Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1  免疫球蛋白结合蛋白-1利福平rifampicin化学标准品 分 子 式: C43H58N4O12 分 子 量: 822.95

CD133  造血干细胞抗原CD133罗汉果皂苷ⅢA1Mogroside III-A1中药标准品  分 子 式: C48H82O19 分 子 量: 963.15328

CD133  造血干细胞抗原（多肽抗原）尾叶香茶菜戊素Kaur-16-en-15-one,1,7,14-trihydroxy-, (1a,7a,14R)-化学标准品 分 子 式: C20H30O4 分 子 量:

H5N1-H5  H5亚型全病毒常春藤皂苷BHederasaponin B中药标准品  分 子 式: C59H96O25 分 子 量: