上海联祖生物科技有限公司
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伞枝梨头霉探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3214
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-05-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3214
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

产品名称

英文名称

货号

伞枝梨头霉探针法荧光定量PCR试剂盒规格

Absidia corymbifera

LZR3214

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品:

*百脉根根瘤菌EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 用途: 模式菌株

黄微绿链霉菌ENG (Endoglin) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces flavovirens

变幻青霉ES (Endostatin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

大豆慢生根瘤菌ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit用途: 与大豆共生固氮,培养基pH4.6生长

尖镰孢EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit用途: 教学科研

美登木植物放线孢菌EPO (Erythropoietin) ELISA Kit 拉丁属名: Plantactinospora mayteni

酿酒酵母FAS/CD95 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae Hansen

产黄青霉FASL/TNFSF6 (Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium chrysogenum

巨兽芽孢杆菌FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus megaterium

pETPT7αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit用途: 表达载体

芽孢杆菌属AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  sp.

粪肠球菌AAP (Alanine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁属名: Enterococcus  faecalis

柠檬黄色农球菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁属名: Agrococcus citreus

赤曲霉FGF21 (Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus ruber

灰平链霉菌Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
伞枝梨头霉探针法荧光定量PCR试剂盒规格Streptococcus suis 2 (Cell protein)  2型猪链球菌菌体蛋白色胺2-(1H-Indol-3-yl)ethanamine氨基酸类 分 子 式: C10H12N2 分 子 量: 160.21568

GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide  胰素样肽-1(多肽)1-乙酰氧基-9,17-十八二烯-12,14-二炔-11,16-二醇11,16-Dihydroxyoctadeca-9,17-dien-12,14-diyn-1-yl acetate对照药材 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43392

ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov  肾上腺髓质素蛋白(N端20肽)桑辛素 T2-(3,5-dihydroxyphenyl)-5-methoxy-4-(3-methylbut-2-enyl)benzofuran-6-ol化学标准品 分 子 式: C20H20O5 分 子 量: 340.37

AGEs  晚期糖基化终末产物AGEs茶皂素Saponin脂肪酸类 分 子 式: C97H137NO17Si2 分 子 量: 1645.29318

AGEs control article(advanced glycosylation end products control article)  晚期糖基化终末产物蛋白对照品当归酰异五味子素OAngeloylisogomisin O中药标准品  分 子 式: C28H34O8 分 子 量: 498.6

ET-1(Endothelin-1)  内皮素-1(蛋白多肽 活性蛋白)纹香茶菜 E1,4-Phenanthrenedione,2-[2-(acetyloxy)-1-methylethyl]-4b,5,6,7,8,8a,9,10-octahydro-3,9,10-trihydroxy-4b,8,8-trimethyl-(9CI)对照药材 分 子 式: C22H30O7 分 子 量:

GRGDS peptide  粘附多肽GRGDSTris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)标准滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: 


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